[發明專利]肺癌診斷分子標記物lncRNA LINC00516和試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201810982670.6
• 申請日: 2018-08-27
• 公開（公告）號: CN108998528B
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 黎孟楓;管洪宇;劉湜樺;劉幫洞;劉蕾;朱勛;吳玨珩;朱婷;吳姍姍;于暕辰
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 單香杰

本發明屬于疾病診斷預防技術領域，具體公開了肺癌診斷分子標記物lncRNA LINC00516和試劑盒及其應用。所述lncRNA LINC00516在肺癌患者血清中特異性顯著上調表達，LINC00516的表達與肺癌的病理類型呈顯著正相關，能夠作為肺癌診斷的分子標記物，尤其可作為肺癌轉移診斷的分子標記物，其靈敏度為81.1%、特異性為88.1%，具有較高的可靠性。本發明還提供了一種肺癌或肺癌轉移診斷試劑盒，包含逆轉錄反應體系和熒光定量PCR反應體系。所述試劑盒檢測快速方便、準確率高，可以實現肺癌的早期診斷和預測。

技術領域

本發明涉及疾病診斷預防技術領域，具體地，涉及肺癌診斷分子標記物lncRNALINC00516和試劑盒及其應用。

背景技術

肺癌發病率和死亡率在我國長期居各惡性腫瘤的首位，其發病時間短、轉移快、預后不理想，其5年生存率僅為15％。肺癌容易發生各個不同臟器的轉移，如腦轉移、骨轉移、肝轉移等，并引起相應的癥狀，對病人生存造成極大的影響。大量研究和資料表明，早期診斷和早期治療是防治肺癌和降低其死亡率的最有效方法，但由于缺乏理想的早期診斷方法，肺癌的早期診斷率僅14％左右。現有的傳統腫瘤標志物(如癌胚抗原)的靈敏度和特異性均不夠高。目前簡單的胸透和痰液細胞學化驗只能對肺癌進行早期診斷且敏感性非常低，關于肺癌轉移診斷方式還缺乏有效、方便的檢測手段。因此，開發一種微創而又特異靈敏的肺癌轉移診斷標志物是當務之急。

人體外周血的循環腫瘤細胞和腫瘤相關的DNA和RNA都可以被用作體外診斷。研究發現，來自血漿和血清中循環核酸相對比較穩定，一些腫瘤組織中會出現表達異常，且和腫瘤惡化有著密不可分的關系。lncRNA是一種長度大于200個核苷酸的RNA分子，沒有編碼蛋白質功能，部分可編輯一些肽類。lncRNA可通過表觀遺傳學、轉錄調控和轉錄后調控等多個層面調節細胞內基因的表達，參與機體各種生理病理過程。相關研究已發現lncRNA可與蛋白質、RNA或DNA形成復合物，調節腫瘤細胞的生長，與癌癥轉移密切相關。進入循環系統的lncRNA在正常條件下能被qRT-PCR檢測到。

血液是最常見的臨床檢驗材料，采集血液也是微小創傷性、無痛苦和極易于被人們接受的取材方法。因此，基于外周血篩選肺癌轉移特異性lncRNA，并用作為分子標志物具有重要的檢測診斷價值。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供一種肺癌或肺癌診斷分子標記物lncRNA LINC00516，所述lncRNALINC00516在肺癌患者血清中特異性顯著上調表達，LINC00516的表達與肺癌的病理類型呈顯著正相關，能夠作為肺癌診斷的分子標記物，尤其可作為肺癌或肺癌轉移診斷的分子標記物，其靈敏度為81.1％、特異性為88.1％，具有較高的可靠性。

本發明的另一目的在于提供所述lncRNA LINC00516在制備肺癌或肺癌轉移診斷試劑盒和/或制劑中的應用。

本發明的另一目的在于提供一組檢測lncRNALINC00516的引物對和探針。

本發明的另一目的在于提供所述引物對和探針在制備肺癌或肺癌轉移診斷試劑盒和/或制劑中的應用。

本發明的另一目的在于提供一種肺癌或肺癌轉移診斷試劑盒。

為了實現上述目的，本發明是通過以下方案予以實現的：

本發明人從肺癌患者的血液中分離和檢測到肺癌轉移特異性lncRNALINC00516呈顯著高表達，發現血液中的LINC00516來源于肺癌細胞，并分泌釋放到血液中。此外，LINC00516的表達與肺癌的病理類型呈顯著正相關，LINC00516對區分肺癌轉移患者和肺癌不轉移患者的靈敏度高達81.1％，特異性高達88.1％。因此，lncRNALINC00516可作為一種新型的肺癌診斷和肺癌轉移血液分子診斷標記物，能顯著提高診斷的準確性、敏感性和特異性。此外，該分子標記物還可作為肺癌轉移治療藥物的新治療靶點。