[發明專利]一種高純度蛋黃磷脂酰乙醇胺的制備方法

在審

• 申請號: 201810978708.2
• 申請日: 2018-08-27
• 公開（公告）號: CN109096327A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 孫娜;陳晉;林松毅;鮑志杰;李冬梅;安佰慧;陸雪琪
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: C07F9/10
• 分類號: C07F9/10
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 劉琦

本發明屬于磷脂深加工技術領域，涉及一種高純度蛋黃磷脂酰乙醇胺的制備方法。將蛋黃粗磷脂溶于氯仿中，以硅膠為固定相，氯仿、甲醇和冰乙酸混合溶液為洗脫劑進行等度洗脫，洗脫過程用薄層色譜進行監控，收集洗脫有磷脂酰乙醇胺的組分，旋轉蒸發濃縮并用氮吹儀干燥，制得純度為90％～98％的蛋黃磷脂酰乙醇胺。本發明采用三元混合溶劑梯度洗脫，操作過程簡單，工藝簡單，不需要復雜的設備，成本低廉，生產效率高，適合工業化生產，其中有機溶劑可以回收使用，填料通過再生處理重復使用。本發明制得的蛋黃磷脂酰乙醇胺純度高，可以用于功能性食品、醫藥、化妝品等工業領域。

技術領域

本發明屬于磷脂深加工技術領域，具體的說涉及一種高純度蛋黃磷脂酰乙醇胺的制備方法。

背景技術

磷脂酰乙醇胺(PE)，又稱腦磷脂，是磷脂的主要組成之一。根據磷酸與甘油連接位置的不同，PE有α和β兩種異構體，天然PE以α為主。由于PE具有親水頭部及疏水尾部的雙極性分子結構，常作為乳化劑用于食品和藥物中，并作為脂質體制備的輔料用于化妝品和藥物輸送，同時在某種程度上還可以傳導細胞信號，緩解抑郁癥和焦躁癥等。蛋黃作為磷脂的主要食物來源之一，其中磷脂酰乙醇胺的含量占蛋黃磷脂總含量的18％。

近年來，磷脂酰乙醇胺在食品和醫藥等領域越來越廣泛的應用，因此制備高純度的磷脂酰乙醇胺具有非常重要的意義。磷脂酰乙醇胺的純化方法有金屬離子沉淀法、超臨界流體萃取法、膜分離法等。由于金屬離子沉淀法會造成重金屬離子殘留，超臨界流體萃取法存在設備成本高，膜分離法存在膜清洗困難等問題。而且，目前對PE的純化大都采用溶劑分級法，工藝過程復雜，制作效率不高。

發明內容

本發明的目的在于是公開一種高純度蛋黃磷脂酰乙醇胺的制備方法：將蛋黃粗磷脂溶于氯仿中，以硅膠為固定相，氯仿、甲醇和冰乙酸混合溶液為洗脫劑進行等度洗脫，洗脫過程用薄層色譜進行監控，收集洗脫有磷脂酰乙醇胺的組分，旋轉蒸發濃縮并用氮吹儀干燥，制得純度為90％～98％的蛋黃磷脂酰乙醇胺。

本發明采用的技術方案如下：

一種高純度蛋黃磷脂酰乙醇胺的制備方法，包括如下步驟：

S1、填料活化：取200～300目的混合硅膠粉加熱活化；

優選方式下，步驟S1所述加熱活化為：50～60℃，4～6h。

S2、裝柱：向步驟S1活化后的硅膠粉中加入氯仿，用玻璃棒攪拌成漿狀，濕法裝入玻璃層析柱中，制得硅膠柱；

優選方式下，步驟S2所述玻璃層析柱的直徑和柱長比為(2～5):25；所述硅膠粉與氯仿的添加量比為3:(5～8)(g/ml)。

S3、上樣：取蛋黃粗磷脂，用氯仿充分溶解，制得樣品溶液，將所述樣品溶液沿柱壁緩緩加入步驟S2制備的硅膠柱中；

優選方式下，步驟S3所述蛋黃粗磷脂的添加量根據步驟硅膠柱中所使用的硅膠粉用量的不同而改變，蛋黃粗磷脂的添加量為10～20mg/g硅膠粉；所述蛋黃粗磷脂與氯仿的料液比為(150～300):1(mg/mL)；所述蛋黃粗磷脂中，磷脂酰膽堿的含量大于60％，磷脂酰乙醇胺的含量大于16％。

S4、等度洗脫：當步驟S3中所述的樣品溶液流至硅膠面時，立即用10～20倍柱體積、體積比為18:5:1～17:5:1的氯仿、甲醇、冰醋酸三元混合液進行洗脫，收集洗脫液；

S5、薄層色譜檢測：對步驟S4收集到的洗脫液用薄層色譜進行檢測，測定洗脫液中組分是否為目標組分，所述目標組分為：薄層色譜檢測中出現單一斑點，且與磷脂酰乙醇胺標準品有同一遷移率的組分；

優選方式下，步驟S5所述的薄層色譜檢測，每收集0.25倍柱體積的洗脫液用薄層色譜檢測一次，是用體積比為75:40:8:3的氯仿、甲醇、冰醋酸和水的混合液作為展開劑進行展開。