[發(fā)明專利]化合物lithocarpinol B及其制備方法和在制備抗真菌藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810974840.6
• 申請日: 2018-08-24
• 公開（公告）號: CN108892658B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李浩華;許建林;章衛(wèi)民;劉洪新;李賽妮
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省微生物研究所（廣東省微生物分析檢測中心）
• 主分類號: C07D319/20
• 分類號: C07D319/20;C12P17/06;A61K31/357;A61P31/10;C12R1/645
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星;王家鳴

1.化合物lithocarpinol B，其特征在于，結(jié)構(gòu)如式（?）所示：

式（?）。

2.一種權(quán)利要求1所述的化合物lithocarpinol B的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）制備Phomopsis lithocarpus FS508的發(fā)酵培養(yǎng)物，用乙酸乙酯萃取該發(fā)酵培養(yǎng)物，將乙酸乙酯萃取液經(jīng)蒸餾濃縮后得到浸膏；用甲醇水溶液溶解浸膏，然后用石油醚萃取，萃取剩下的甲醇水溶液部分蒸餾濃縮得到棕黑色浸膏；

（2）將棕黑色浸膏過正相硅膠柱，用石油醚-乙酸乙酯從10:1, 7:1, 9:2, 3:1, 2:1,1:1, 1:2 v/v梯度洗脫，收集石油醚：乙酸乙酯體積比3:1洗脫的餾分F6，組分F6經(jīng)Sephadex LH-20柱，以二氯甲烷：甲醇=1:1 v/v作為洗脫劑，收集TLC薄層層析以石油醚：乙酸乙酯=2:1 v/v展開得Rf=3.0/3.8的組分，然后過正相硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯從6:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 0:1 v/v梯度洗脫，收集TLC薄層層析以二氯甲烷：甲醇=20:1v/v展開得Rf=3.3/3.6的組分，再用HPLC純化得到化合物lithocarpinol B；

所述的HPLC純化是用全制備HPLC分離該組分，全制備HPLC的色譜條件為： YMC ODS-A柱，流動相為體積比85:15的甲醇/水，流速為8 mL/min，于保留時間14.8min處收集洗脫餾分，最后用半制備HPLC純化該組分，半制備HPLC的色譜條件為：YMC-pack ODS-A/AQ柱，流動相為體積比82:18的乙腈/水，流速為3 mL/min，保留時間9.4min，得到化合物lithocarpinol B；

所述的Phomopsis lithocarpus FS508保藏編號為：GDMCC NO：60433。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述的制備Phomopsis lithocarpusFS508的發(fā)酵培養(yǎng)物是將活化的Phomopsis lithocarpus FS508菌種接入到馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，28 ℃，120 rpm，培養(yǎng)5 d制得種子液，將種子液以10% mL/g的接種量接入到大米固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，室溫下靜置培養(yǎng)一個月，制得發(fā)酵培養(yǎng)物，所述馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基通過以下方式獲得：將馬鈴薯洗凈去皮，切成大小約為1 cm³的小塊，稱量200 g，放入1 L水中煮沸20~30分鐘，用雙層紗布過濾，取濾液，在濾液中加入海鹽15 g、葡萄糖20 g，加水補(bǔ)足1 L，滅菌制得；所述的大米固體發(fā)酵培養(yǎng)基通過以下方式獲得：分別稱量3 g 海鹽和160 g大米，加200 mL水，攪拌混合，滅菌制得。

4.深海真菌Phomopsis lithocarpus FS508在制備權(quán)利要求1所述的化合物lithocarpinol B中的應(yīng)用；所述的Phomopsis lithocarpus FS508保藏編號為：GDMCC NO：60433。

5.權(quán)利要求1所述的化合物lithocarpinol B在制備抗黃曲霉的藥物中的應(yīng)用。

6.一種抗真菌藥物，其特征在于，含有權(quán)利要求1所述的化合物lithocarpinol B作為有效成分。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的抗真菌藥物，其特征在于，所述的抗真菌藥物為抗黃曲霉的藥物。