[發明專利]一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒

在審

• 申請號: 201810974389.8
• 申請日: 2018-08-24
• 公開（公告）號: CN109097473A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 段小紅;李曼曼;承康平;丁蕊;張磊;王東亮;周啟明
• 申請（專利權）人: 南京求臻基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 南京思拓知識產權代理事務所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤

本發明公開了一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒。miRNA647作為檢測非小細胞肺癌的miRNA標志物在制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑中的應用。一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒，包括由SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物。本發明發現了miRNA647表達水平與非小細胞肺癌的發生有關，通過檢測血液中miRNA647的表達水平，結合臨床癥狀可以判斷其是否患有非小細胞肺癌或者是否存在患有非小細胞肺癌的風險，從而指導臨床醫師給予其預防方案或者治療方案。因此，檢測miRNA647表達水平的引物、探針等試劑可以用于制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑。

技術領域

本發明屬于生物醫藥檢測領域，涉及一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒。

背景技術

肺癌是目前世界范圍內發生率和病死率第一的惡性腫瘤，每年新發患者大約有50萬例，盡管近年來在肺癌診斷治療上有很多的進展，但其5年生存率僅為15％-17％。從組織學上，肺癌分為小細胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC)和非小細胞肺癌(non-smallcell lung cancer，NSCLC)，所占比例分別為15％和85％。其中非小細胞肺癌大都在晚期才能被發現，其5年生存率不到15％，所以如果可以做到早期診斷，其生存率將會有所提高?，F階段的檢測的主要手段是影像學和纖維支氣管鏡檢查，與二者相比，腫瘤標志物檢測具有風險小、無輻射、低成本以及簡便等優點。

MicroRNA(miRNA)是一種大小為19-22個核苷酸的內源性單鏈小分子RNA，廣泛存在于真核生物中，在生物進化過程中高度保守，在細胞中可以特異性表達。miRNA可以通過與目標mRNA特異性堿基互補配對引導沉默復合體(RISC)，降解mRNA或阻遏其翻譯，在轉錄后水平調節相關基因表達，從而在細胞增殖、分化、凋亡等過程發揮重要的作用。研究表明，miRNA與腫瘤密切相關，在腫瘤的發生或發展過程中常常伴隨著染色體的缺失或者擴增，從而導致癌基因的激活或者抑癌基因的失活。研究表明，許多miRNA分子定位在與腫瘤密切相關的染色體變異區內，單一的miRNA能夠靶向多個mRNA，從而調節多個蛋白的表達，miRNA表達紊亂是導致一系列腫瘤形成的重要因素。近年來miRNA成為研究熱點，研究表明miRNA通過調控靶基因的表達可以影響腫瘤的增殖、侵襲、轉移、凋亡等多種過程。例如，miRNA-124可以通過下調CDK4的表達來抑制乳腺癌細胞的增殖；miRNA-214通過作用p53使乳腺癌細胞的侵襲能力增強；miRNA-144促進肺癌細胞凋亡。miRNA的異常表達可以誘導與疾病相關基因的表達發生異常，從而誘發腫瘤的發生，因此直接檢測miRNA的表達水平可以為腫瘤的臨床診斷提供一定的參考，使其在各種腫瘤疾病的臨床診斷、治療以及預后評估方面起著重要作用。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述缺陷，提供一種檢測非小細胞肺癌的miRNA標志物的應用。

本發明的另一目的是提供檢測該標志物的引物、探針或基因芯片在制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑中的應用。

本發明的又一目的是提供一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒。

本發明的目的可通過以下技術方案實現：

miRNA647作為檢測非小細胞肺癌的miRNA標志物在制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑中的應用。

檢測miRNA647的引物、探針或基因芯片在制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑中的應用。

所述的檢測miRNA647的引物優選由SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物組成。

一種用于制備非小細胞肺癌輔助診斷試劑的引物，其特征在于由SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物組成。

一種非小細胞肺癌輔助診斷試劑盒，包括上述的引物。