[發(fā)明專利]包含核酸及CAR修飾的免疫細(xì)胞的治療劑及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810972140.3
• 申請(qǐng)日: 2018-08-24
• 公開（公告）號(hào): CN110856724B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡放;陳璨;肖琳;傅瑾;張蓉;蔡金露
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 杭州康萬(wàn)達(dá)醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/62
• 分類號(hào): C12N15/62;C12N5/10;C12N7/01;A61K35/761;A61K35/763;A61K35/765;A61K35/766;A61K35/768;A61K35/17;A61P35/00;C07K19/00
• 代理公司: 北京天昊聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11112
• 代理人: 王靜;丁業(yè)平

1.一種用于治療腫瘤和/或癌癥的治療劑，包含：

(a)第一組合物，其中該第一組合物包含位于第一可藥用載體中的第一活性成分，所述第一活性成分包括或含有用于導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞和/或癌細(xì)胞的、具有標(biāo)記性多肽編碼序列的核酸；所述標(biāo)記性多肽具有可操作地連接的胞外抗原決定區(qū)、間隔部分和跨膜部分，能夠經(jīng)表達(dá)而修飾在所述腫瘤細(xì)胞和/或癌細(xì)胞的表面；所述胞外抗原決定區(qū)的氨基酸序列含有一個(gè)或多個(gè)抗原表位多肽的氨基酸序列；其中在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜蛋白或分泌蛋白的氨基酸序列不含有所述抗原表位多肽的氨基酸序列；以及

(b)第二組合物，其中該第二組合物包含位于第二可藥用載體中的第二活性成分，所述第二活性成分包含嵌合抗原受體修飾的免疫細(xì)胞；所述的嵌合抗原受體修飾的免疫細(xì)胞能夠特異性識(shí)別并結(jié)合所述抗原表位多肽的氨基酸序列；

其中所述間隔部分來(lái)自CD8α的鉸鏈區(qū)、IgG的鉸鏈區(qū)或IgD的鉸鏈區(qū)；

其中所述抗原表位多肽的氨基酸序列選自以下標(biāo)簽的氨基酸序列：Myc標(biāo)簽、HA標(biāo)簽、Strep標(biāo)簽II、Flag標(biāo)簽、HAT標(biāo)簽、S標(biāo)簽、S1標(biāo)簽、蛋白C標(biāo)簽、tag-100標(biāo)簽、E2標(biāo)簽、TAP標(biāo)簽、HSV標(biāo)簽、KT3標(biāo)簽、S1標(biāo)簽、V5標(biāo)簽、VSV-G標(biāo)簽、His標(biāo)簽或RFP標(biāo)簽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述胞外抗原決定區(qū)的氨基酸序列如SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5所示。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述間隔部分的氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示；其中所述跨膜部分來(lái)源于CD8、CD3ζ、CD4或CD28的跨膜區(qū)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的治療劑，其中所述跨膜部分的氨基酸序列如SEQ ID NO:7所示。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述標(biāo)記性多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15所示。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述核酸包括DNA或RNA；所述RNA包括由所述DNA轉(zhuǎn)錄的mRNA。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述第一活性成分為重組病毒，所述重組病毒的基因組具有標(biāo)記性多肽編碼序列；其中，所述重組病毒包括選擇復(fù)制型重組溶瘤病毒或復(fù)制缺陷型重組病毒。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的治療劑，其中所述重組溶瘤病毒來(lái)源于具有溶瘤作用的經(jīng)基因突變的病毒和具有溶瘤作用的野生型病毒。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的治療劑，其中所述重組溶瘤病毒來(lái)源于具有溶瘤作用的腺病毒、痘病毒、單純皰疹病毒、麻疹病毒、塞姆利基森林病毒、水皰性口炎病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、呼腸孤病毒、塞內(nèi)卡谷病毒、埃可型腸道病毒、柯薩奇病毒、新城疫病毒和馬拉巴病毒。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療劑，其中所述嵌合抗原受體包括可操作地連接的、依次串聯(lián)的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域、間隔區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域能夠特異性識(shí)別并結(jié)合所述抗原表位多肽的氨基酸序列。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的治療劑，其中所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列如SEQ IDNO:42、SEQ ID NO:43或SEQ ID NO:44所示。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的治療劑，其中所述胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域來(lái)自淋巴細(xì)胞胞內(nèi)激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)和可任選的淋巴細(xì)胞共刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)，其中所述胞內(nèi)激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)選自CD3ζ或DAP12的胞內(nèi)激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)；所述可任選的淋巴細(xì)胞共刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)選自4-1BB、CD28、CD27、OX40、GITR、和/或ICOSS的共刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)。