[發明專利]一種降低海藻糖濁度的方法

在審

• 申請號: 201810970926.1
• 申請日: 2018-08-24
• 公開（公告）號: CN108866125A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 王作學;何球山;張國軍;黃海軍
• 申請（專利權）人: 湖南匯升生物科技有限公司
• 主分類號: C12P19/14
• 分類號: C12P19/14;C12P19/12;C07H3/04;C07H1/06
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述方法包含如下步驟：

(1)將利用海藻糖合酶轉化法制得的海藻糖酶反應液加熱至80～100℃，保溫10～30分鐘，降溫，然后加入糖化酶，糖化酶加入量為12～24U/ml，調pH 4.0～7.0，控制糖化溫度為60～65℃，酶解時間8～12h，然后升溫至80～100℃，保溫10～30分鐘，過濾，制得海藻糖粗液；

(2)向步驟(1)制得的海藻糖粗液中添加質量占海藻糖粗液總質量0.5％～3％的活性炭，脫色20～60分鐘，過濾，得到一次濾液；

(3)在步驟(2)制得的得到一次濾液中添加質量占一次濾液總質量0.5～0.8％的檸檬酸、0.1～0.5％的NaCl以及6～8％的ZnCl₂后依次經過弱堿性陰離子樹脂和弱酸性陽離子樹脂后進行過濾，得到二次濾液；

(4)在步驟(3)制得的二次濾液中加入質量占二次濾液總質量0.5％～3％的活性炭進行脫色后過濾，脫色20～60分鐘，過濾，得到三次濾液；

(5)在步驟(4)制得的三次濾液中加入質量占三次濾液總質量0.3～0.8％的Na₂CO₃、8～12％的乙醇后靜置0.5～1.5小時，過濾，得到四次濾液；

(6)在步驟(5)制得的四次濾液中加入質量占四次濾液總質量5～10％的無水乙醇、0.1～3％的晶種并進行濃縮起晶后降溫至20～30℃進行自然結晶，離心后得濕結晶；

(7)將步驟(6)得到的濕結晶進行干燥，得到海藻糖成品。

2.如權利要求1所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述方法包含如下步驟：

(1)將利用海藻糖合酶轉化法制得的海藻糖酶反應液加熱至85℃，保溫20分鐘，降溫，然后加入糖化酶，糖化酶加入量為20U/ml，調pH 6.0，控制糖化溫度為65℃，酶解時間10h，然后升溫至95℃，保溫20分鐘，過濾，制得海藻糖粗液；

(2)向步驟(1)制得的海藻糖粗液中添加質量占海藻糖粗液總質1％的活性炭，脫色45分鐘，過濾，得到一次濾液；

(3)在步驟(2)制得的得到一次濾液中添加質量占一次濾液總質量0.6％的檸檬酸、0.3％的NaCl以及6.5％的ZnCl₂后依次經過弱堿性陰離子樹脂和弱酸性陽離子樹脂后進行過濾，得到二次濾液；

(4)在步驟(3)制得的二次濾液中加入質量占二次濾液總質量1％的活性炭進行脫色后過濾，脫色45分鐘，過濾，得到三次濾液；

(5)在步驟(4)制得的三次濾液中加入質量占三次濾液總質量0.6％的Na₂CO₃、10％的乙醇后靜置1小時，過濾，得到四次濾液；

(6)在步驟(5)制得的四次濾液中加入質量占四次濾液總質量8％的無水乙醇、2％的晶種并進行濃縮起晶后降溫至25℃進行自然結晶，離心后得濕結晶；

(7)將步驟(6)得到的濕結晶進行干燥，得到海藻糖成品。

3.如權利要求1或2所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，一次濾液依次流經弱堿性陰離子樹脂和弱酸性陽離子樹脂的速度為15～20mL/min。

4.如權利要求1-3任一所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，一次濾液依次流經弱堿性陰離子樹脂和弱酸性陽離子樹脂的速度為15mL/min。

5.如權利要求1-4任一所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(6)中，濃縮的溫度為45～55℃。

6.如權利要求1-5任一所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(6)中，結晶的時間為60～70h。

7.如權利要求1-6任一所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(6)中，離心的時間為10～20min。

8.如權利要求1-7任一所述的一種降低海藻糖濁度的方法，其特征在于，所述步驟(6)中，離心的轉速2500～3500r/min。