[發(fā)明專利]一種人參皂苷酶解產(chǎn)物的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810961086.2
• 申請(qǐng)日: 2018-08-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109022529A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 畢云楓;劉景圣
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P33/00
• 分類號(hào): C12P33/00
• 代理公司: 長(zhǎng)春眾邦菁華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 李外

本發(fā)明提供一種人參皂苷酶解產(chǎn)物的制備方法，屬于人參皂苷制備技術(shù)領(lǐng)域。該方法先將含人參皂苷原料和人參皂苷降解酶反應(yīng)，得到人參皂苷酶解反應(yīng)產(chǎn)物；將人參皂苷酶解反應(yīng)產(chǎn)物加入到溶劑中進(jìn)行沉淀，得到沉淀產(chǎn)物；將沉淀產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液進(jìn)行旋蒸，得到旋蒸濃縮液；最后將旋蒸濃縮液進(jìn)行干燥，得到人參皂苷酶解產(chǎn)物。本發(fā)明使用溶劑處理酶解產(chǎn)物，既減少了高溫除酶及過(guò)濾的步驟，又有效的去除了反應(yīng)體系中的酶，同時(shí)有效的回收了人參皂苷產(chǎn)物，回收率可達(dá)到90％以上，本發(fā)明的方法工藝簡(jiǎn)單、成本低，特別適宜用于酶解人參皂苷的工業(yè)生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于人參皂苷制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種人參皂苷酶解產(chǎn)物的制備方法。

背景技術(shù)

人參的主要活性成分為人參皂苷。人參皂苷是由糖和苷元相連而成的糖苷類化合物，屬于三萜類皂苷。人參皂苷中含量最多的是原人參二醇型(Protopanaxdiol)皂苷和原人參三醇型(Protopanaxtriol)皂苷，原人參二醇型皂苷包括人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、F2、Rg3、Rh2、人參皂苷化合物K(CK)等；原人參三醇型皂苷包括人參皂苷Re、Rg1、Rf、Rg2、Rh1等。其中人參皂苷Rb1、Rb2、Rc、Re、Rg1、Rd的含量較高，而人參皂苷Rg2、Rg3、Rh1、Rh2、CK等在天然人參中含量只有十萬(wàn)分之幾或不存在，為稀有人參皂苷。許多藥理研究表明，稀有人參皂苷藥理效果更好、更容易吸收入血、生物利用度更高。因此，獲得大量的稀有人參皂苷具有重要的社會(huì)價(jià)值，是眾多科研人員研究的熱點(diǎn)。傳統(tǒng)的炮制方法可以提高這些稀有人參皂苷的含量，但其含量仍然非常低。因此，亟待開(kāi)展新型綠色環(huán)保生產(chǎn)工藝的研究以提高這些稀有人參皂苷的轉(zhuǎn)化率和中藥材資源的利用效率，降低稀有人參皂苷的生產(chǎn)成本。

常用的水解皂苷的方法有酸水解法、堿水解法和生物轉(zhuǎn)化法。但是它們的水解條件都十分劇烈，不易控制，而且由于在水解過(guò)程中能使皂苷元發(fā)生脫水、環(huán)合、雙鍵位移、取代基位移、構(gòu)型轉(zhuǎn)化等變化，使水解的副產(chǎn)物增多，目標(biāo)產(chǎn)物很難得到。更重要的是酸、堿水解法對(duì)環(huán)境造成很大程度上的危害，所以需要尋找新的轉(zhuǎn)化技術(shù)和方法，即能更有效的將低活性、高含量的植物皂苷轉(zhuǎn)化成高活性、天然含量低的單體皂苷，又能做到不給環(huán)境造成負(fù)擔(dān)的轉(zhuǎn)化技術(shù)和方法。生物轉(zhuǎn)化尤其是酶的區(qū)域和立體選擇性強(qiáng)、反應(yīng)條件溫和、操作簡(jiǎn)便、成本較低、公害少，且能完成一些化學(xué)合成難以進(jìn)行的反應(yīng)，克服了傳統(tǒng)酸、堿水解方法的缺陷，又減少了污染物的產(chǎn)生，符合從末端治理向源頭控制轉(zhuǎn)化的新型現(xiàn)代生產(chǎn)模式，因而越來(lái)越受到重視。

當(dāng)前酶解人參皂苷用來(lái)生產(chǎn)人參次級(jí)皂苷和人參稀有皂苷成為研究熱點(diǎn)。但酶解人參皂苷產(chǎn)物的回收方法一般先是在反應(yīng)完成的條件下加熱至60℃以上，使酶失活，然后過(guò)濾，濾液使用低極性有機(jī)溶劑如乙酸乙酯等萃取，或是經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂及硅膠柱層析等回收。導(dǎo)致產(chǎn)物回收率低，工藝復(fù)雜，成本大大提高，同時(shí)使用有機(jī)溶劑和柱層析法不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有的酶解人參皂苷產(chǎn)物的回收方法需要加熱使酶失活，產(chǎn)物回收率低、工藝復(fù)雜等問(wèn)題，而提供一種人參皂苷酶解產(chǎn)物的制備方法。

本發(fā)明提供一種人參皂苷酶解產(chǎn)物的制備方法，包括：

步驟一：將含人參皂苷原料和人參皂苷降解酶反應(yīng)，得到人參皂苷酶解反應(yīng)產(chǎn)物；

步驟二：將步驟一的人參皂苷酶解反應(yīng)產(chǎn)物加入溶劑中進(jìn)行沉淀，得到沉淀產(chǎn)物；

步驟三：將步驟二得到的沉淀產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)濾，得到濾液進(jìn)行旋蒸，得到旋蒸濃縮液；

步驟四：將步驟三得到的旋蒸濃縮液進(jìn)行干燥，得到人參皂苷酶解產(chǎn)物。

優(yōu)選的是，所述步驟一的含人參皂苷原料為人參皂苷、人參莖葉皂苷、人參果皂苷、三七皂苷、絞股藍(lán)皂苷或以上皂苷的分離產(chǎn)物。

優(yōu)選的是，所述步驟一的人參降解酶包括β-葡萄糖苷酶、阿拉伯糖苷酶、鼠李糖苷酶、糖醛酸酶、蝸牛酶或半乳糖酶。