[發明專利]辣根過氧化物酶磁性納米花及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201810955835.0
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN109234261B
• 公開（公告）日: 2022-03-22
• 發明（設計）人: 韓娟;王赟;毛艷麗;王蕾;李春梅;倪良;羅鵬
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14;B01J13/02;C02F3/34;C02F101/34
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1.一種辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，所述磁性納米花具有磁性，呈花狀，具體步驟如下：

（1）溶液配制：

磷酸鹽緩沖溶液的配制：配制Na₂HPO₄溶液并用相同濃度的NaH₂PO₄ 調節pH；所述的Na₂HPO₄溶液濃度為0.05~0.5M，所述pH為6~9；

（2）辣根過氧化物酶固定化過程：

將HRP加入到配置的磷酸鹽緩沖溶液中，然后將合成的磁性復合微球Fe₃O₄@PMG@IDA-Cu²⁺加入到上述反應液中，調節恒溫箱溫度，持續反應一定的時間，將得到的納米花用PBS溶液和蒸餾水洗滌數次，真空干燥過夜；所述的HRP濃度為0.3-0.7 mg/mL；

所述反應的時間為6-10h；

所述的磁性復合微球Fe₃O₄@PMG@IDA-Cu²⁺的制備方法，具體步驟如下：

S1.亞氨基二乙酸修飾的四氧化三鐵/聚合N，N’-亞甲基雙丙稀酰胺合環氧丙基微球（Fe₃O₄@PMG@IDA微球）的合成：

稱取一定量的亞氨基二乙酸和一定量NaOH，將其溶解在蒸餾水中并用NaOH溶液調節pH值；之后將Fe₃O₄@PMG加入到上述溶液中，在一定溫度條件下機械攪拌反應，得到的材料用乙醇洗滌，然后真空干燥過夜；

所述的IDA加入量、NaOH和Fe₃O₄@PMG的質量比為0.23-0.43g:0.1-0.3g:50mg；

S2. 對Fe₃O₄@PMG@IDA表面進行Cu²⁺的修飾：

稱取Fe₃O₄@PMG@IDA 于燒杯中，加入一定濃度的CuSO₄用磁子攪拌一段時間，得到的材料用蒸餾水洗滌后真空干燥過夜；所述Fe₃O₄@PMG@ID和CuSO₄的用量比為50mg ：10mL，其中，所述CuSO₄ 的濃度為0.05-0.15 M。

2. 根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，所述Na₂HPO₄溶液濃度為0.2 M；所述pH為7。

3.根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，步驟（2）中所述的HRP濃度為0.5 mg/mL。

4.根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，步驟（2）中所述反應的時間為8h；所述恒溫箱溫度為25℃。

5.根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述調節溶液的pH為10-12。

6.根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，步驟S1中所述機械攪拌的溫度為60-100℃，反應12小時。

7.根據權利要求1所述的辣根過氧化物酶磁性納米花的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述磁子攪拌時間為1-3 h。

8.權利要求1~7任一項所述方法制備的辣根過氧化物酶磁性納米花用于對污染物雙酚A的降解，包括：向濃度為50-250 mol·L^-1的雙酚A溶液加入相同量的磁性納米花，控制總反應體積為5mL，使得納米花在反應體系中濃度大于0.05 mol·L^-1，將溶液轉移到恒溫震蕩箱，調節溫度范圍為20℃~80℃。