[發明專利]液基細胞保存液及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 201810955086.1
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN108770836A
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發明（設計）人: 李樂林;付康
• 申請（專利權）人: 生工生物工程（上海）股份有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李青

本發明公開了一種液基細胞保存液及其制備方法和應用，涉及生物技術領域。本發明提供的液基細胞保存液，按重量份數計包括以下組分：固定劑12?18份，抗凝劑2?8份，緩沖劑2?10份，離子強度維持劑0.5?0.85份，抗微生物試劑2?8份，粘液溶解劑0.05?0.2份和清潔劑0.1?0.4份。該液基細胞保存液具有保存細胞穩定性高、細胞固定良好、成本低和保留細胞形態更完整等優點。此外，本發明還提供了液基細胞保存液的制備方法和其在保存人體脫落細胞中的應用。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體而言，涉及一種液基細胞保存液及其制備方法和應用。

背景技術

宮頸癌的發病率居女性生殖道惡性腫瘤的首位。全球每年有近50萬宮頸癌新發病例，其中83％發生在發展中國家，我國年新發病例13.15萬，占28.8％。全世界每年約有29萬人死于宮頸癌，我國約有3萬人。因此，宮頸癌防治已成為全球性的公共衛生問題。

液基薄層細胞檢測(Thin-Cytologic Test，TCT)是采用液基薄層細胞檢測系統來檢測宮頸細胞并進行細胞學的分類診斷，它是目前國際上較先進的一種宮頸癌細胞學檢查技術，與傳統的宮頸刮片巴氏涂片檢查相比，TCT明顯提高了標本的滿意度及宮頸異常細胞檢出率。TCT從根本上解決了常規脫落細胞制片假陰性率高、丟失細胞率高(80％)和涂片質量差等技術難題，使宮頸癌的陽性檢出率達95％以上，為脫落細胞學診斷作出了重大貢獻。

過去TCT需要應用國外的制片機和細胞保存液，由于價格昂貴，在國內也只能是一些大醫院才能開展該項目，在基層醫院的推廣則比較緩慢。后來國內的一些廠家研發了半自動的離心法制片機，并自主研發了細胞保存液，降低了薄層液基細胞的制片成本。但目前國內研發的細胞保存液往往存在性能不穩定，保存效果不佳等問題，市場占有率不高。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種液基細胞保存液，它具有保存細胞穩定性高、細胞固定良好、成本低和保留細胞形態更完整等優點，而且還能夠選擇性消除紅細胞，抑制白細胞，有效殺滅微生物，破壞逆轉錄酶活性，保留待檢細胞核酸和蛋白質完整結構，便于分析，從而提高TCT的篩查靈敏度和特異性。

本發明的第二目的在于提供一種液基細胞保存液的制備方法，該制備方法操作簡單，便于工業化生產。

本發明的第三目的在于提供液基細胞保存液在保存人體脫落細胞中的應用。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

第一方面，本發明提供了一種液基細胞保存液，按重量份數計包括以下組分：固定劑12-18份，抗凝劑2-8份，緩沖劑2-10份，離子強度維持劑0.5-0.85份，抗微生物試劑2-8份，粘液溶解劑0.05-0.2份和清潔劑0.1-0.4份。

進一步，在本發明提供的技術方案的基礎上，按重量份數計包括以下組分：固定劑13-17份，抗凝劑3-7份，緩沖劑3-7份，離子強度維持劑0.5-0.75份，抗微生物試劑3-7份，粘液溶解劑0.06-0.15份和清潔劑0.15-0.3份。

進一步，在本發明提供的技術方案的基礎上，按重量份數計包括以下組分：固定劑14-16份，抗凝劑4-6份，緩沖劑4-6份，離子強度維持劑0.55-0.65份，抗微生物試劑4-6份，粘液溶解劑0.08-0.11份和清潔劑0.18-0.22份。

進一步，在本發明提供的技術方案的基礎上，所述固定劑包括乙醇、甲醛或戊二醛中的一種或多種，優選乙醇；

優選地，所述抗凝劑包括乙二胺四乙酸二鈉、檸檬酸鈉或乙二胺四乙酸二鉀中的一種或多種，優選乙二胺四乙酸二鈉。

進一步，在本發明提供的技術方案的基礎上，所述緩沖劑包括醋酸鈉、磷酸氫二鈉或磷酸二氫鈉中的一種或多種，優選醋酸鈉；