[發(fā)明專(zhuān)利]一種草魚(yú)出血病口服型疫苗及其制備與用途在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810949894.7 | 申請(qǐng)日: | 2018-08-20 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109053900A | 公開(kāi)(公告)日: | 2018-12-21 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 余新炳;姜紅燁;林志鵬;周心怡;邊青 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 中山大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào): | C07K19/00 | 分類(lèi)號(hào): | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/75;A61K39/15;A61P31/14;A61P7/04 |
| 代理公司: | 上海光華專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙) 31219 | 代理人: | 許亦琳;余明偉 |
| 地址: | 510275 *** | 國(guó)省代碼: | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 制備 氨基酸序列 呼腸孤病毒 口服型疫苗 口服疫苗 融合蛋白 魚(yú)出血病 草魚(yú) 魚(yú)體 種草 枯草芽孢桿菌芽孢 免疫保護(hù)效果 生物技術(shù)領(lǐng)域 草魚(yú)出血病 核苷酸序列 衣殼蛋白 制備工藝 注射免疫 捕撈 損傷 注射 疫苗 抵抗 | ||
1.一種融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白含有枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotC和草魚(yú)呼腸孤病毒VP4蛋白,所述草魚(yú)呼腸孤病毒VP4蛋白的氨基酸序列對(duì)應(yīng)于如SEQ IDNO.8所示核苷酸序列所編碼的氨基酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述草魚(yú)呼腸孤病毒VP4蛋白的編碼核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotC的氨基酸序列對(duì)應(yīng)于如SEQ ID NO.7所示核苷酸序列所編碼的氨基酸序列。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotC的編碼核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列中含有如SEQ ID NO.9所示核苷酸序列所編碼的氨基酸序列。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列中含有如SEQ ID NO.10所示核苷酸序列所編碼的氨基酸序列。
7.一種制備如權(quán)利要求1~6任一權(quán)利要求所述融合蛋白的方法,包括如下步驟:
(1)獲得目的基因;
(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒:將步驟(1)所得目的基因以及載體質(zhì)粒進(jìn)行連接,獲得重組質(zhì)粒;
(3)將步驟(2)所得重組質(zhì)粒導(dǎo)入感受態(tài)細(xì)胞,轉(zhuǎn)化;
(4)篩選陽(yáng)性克隆,并將正確的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化宿主感受態(tài)細(xì)胞;
(5)誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,還包括以下特征中的任一項(xiàng)或多項(xiàng):1)步驟(1)中,所述目的基因的核苷酸序列含有枯草芽孢桿菌芽孢衣殼蛋白CotC的編碼核苷酸序列和草魚(yú)呼腸孤病毒VP4蛋白的編碼核苷酸序列;2)步驟(3)中,所述感受態(tài)細(xì)胞為DH-5α感受態(tài)細(xì)胞;3)步驟(4)中,所述宿主感受態(tài)細(xì)胞為枯草芽孢桿菌WB600感受態(tài)細(xì)胞。
9.如權(quán)利要求1~6任一權(quán)利要求所述融合蛋白在制備草魚(yú)出血病口服疫苗中的用途。
10.一種草魚(yú)出血病口服疫苗,含有如權(quán)利要求1~6任一權(quán)利要求所述融合蛋白。
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