[發明專利]一種山慈菇試管內無菌繁育技術

在審

• 申請號: 201810946055.X
• 申請日: 2018-08-20
• 公開（公告）號: CN109076958A
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發明（設計）人: 陳風雷;孟凡平;余勝梅
• 申請（專利權）人: 湖北仙草谷中藥材有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種山慈菇試管內無菌繁育技術，包括以下步驟：（1）種子采集；（2）種子預處理；（3）種子裝盤；（4）催芽培養；（5）馴化壯苗。本發明先對山慈菇種子進行預處理，采用試管育苗方法，再利用調整的半量MS培養液和室內恒溫培養誘導山慈菇種子萌發，待山慈菇種子萌發兩個月后將山慈菇幼苗移栽至苗圃培養成為商品馴化苗，提高了繁殖系數，避免了品種退化，對在種子裝盤步驟中使用的細沙進行了高溫滅菌消毒，減少了病蟲害，使用常見的器材，降低組織培養技術成本，技術難度較小，種植成活率較高。

技術領域

本發明涉及育苗技術領域，尤其涉及試管內育苗，具體為一種山慈菇試管內無菌繁育技術。

背景技術

山慈菇，中藥名。為蘭科植物杜鵑蘭、獨蒜蘭或云南獨蒜蘭的干燥假鱗莖。前者習稱“毛慈菇”，后二者習稱“冰球子”，別名還有金燈、朱姑、鹿蹄草、無義草等。夏、秋二季采挖。山慈菇味甘、微辛，性涼。具有清熱解毒，消癰散結等功效，常用于癰腫疔毒，瘰疬痰核，蛇蟲咬傷，瘸瘕痞塊。

目前人工培育山慈菇主要有3種方法：一是以整個球莖作種；二是切除球莖，留球莖在頂芽上；三是用刀直接在芽的基部將頂芽挖下，作為種子育苗，整個球莖食用，留種的數量以整個球莖作種計算，一般每畝50～55公斤。但是在水田種植的方法繁殖系數較低，品種容易退化，病蟲害較多，種植成活率也較低。

發明內容

本發明的目的在于提供一種山慈菇試管內無菌繁育技術，以解決目前在水田種植的方法繁殖系數較低，品種容易退化，病蟲害較多，種植成活率也較低的問題。

為了實現以上目標，本發明通過以下的技術方案實現：（1）種子采集：選取成熟未開裂蒴果，依次用0.1%生汞進行表面消毒、無菌水洗凈、無菌濾紙吸干多余水分后晾干，然后，將蒴果在無菌狀態下切開，并將種子撒播于盛有培養基的玻璃器皿中；（2）種子預處理：向每瓶培養基中加入1mL0.1%瓊脂，振蕩瓶身使種子充分混勻并平鋪于培養基中，再用報紙將整個玻璃器皿包緊，不透光為準，在室內26攝氏度條件下靜置72h；（3）種子裝盤：將靜置完成后的種子取出，與消毒過的細沙按1:5的比例拌勻，再均勻的撒到裝有濕潤育苗基質的試管中，細沙可采用高溫滅菌消毒處理；（4）催芽培養：將試管置于25℃培養室中進行無菌培養，誘導種子萌發階段采用暗培養，培養150天左右后，山慈菇種子開始萌發，此時種胚突破種皮、體積明顯增大并形成白色原球莖；（5）馴化壯苗：山慈菇萌芽兩個月后將其移栽至事先準備好的苗圃中進行馴化壯苗。苗圃基質采用腐殖土即可。移栽完成后立即噴施一次多菌靈藥劑。之后每3天噴一次全量MS培養液生根壯苗。大棚內溫度控制在20攝氏度以上；進一步的，所述培養基成分為1/2MS+2.0mg·L-l 6-BA+0.2 mg·L-lNAA+0.05%千酪素+2%蔗糖+0.75%活性炭+0.55%瓊脂，且pH5.8。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：

本發明先對山慈菇種子進行預處理，采用試管育苗方法，再利用調整的半量MS培養液和室內恒溫培養誘導山慈菇種子萌發，待山慈菇種子萌發兩個月后將山慈菇幼苗移栽至苗圃培養成為商品馴化苗，提高了繁殖系數，避免了品種退化，對在種子裝盤步驟中使用的細沙進行了高溫滅菌消毒，減少了病蟲害，使用常見的器材，降低組織培養技術成本，技術難度較小，種植成活率較高，實驗結果表明，15天左右后，山慈菇種子開始萌發，此時種胚突破種皮、體積明顯增大并形成白色原球莖繁育周期短，且種植成活率也較高。

具體實施方式

下面將對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發明保護的范圍。

一、操作器材：玻璃器皿，如燒杯、培養皿等；報紙；試管；塑料大棚；苗圃；高溫滅菌消毒裝置。

二、操作過程：

1、種子采集