[發(fā)明專利]一種基于小反芻獸疫病毒受體的細(xì)胞BHK/slam/v

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810942663.3
• 申請(qǐng)日: 2018-08-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109266615A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳錦艷;尚佑軍;田宏;曹小安;王耀杰;張吉利;劉湘濤;劉永生
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所
• 主分類號(hào): C12N5/10
• 分類號(hào): C12N5/10;C12N15/12;C12N15/867
• 代理公司: 甘肅省知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)中心 62100
• 代理人: 鮮林

本發(fā)明提供一種基于小反芻獸疫病毒受體的細(xì)胞BHK/slam/v，其保藏號(hào)為：CCTCC NO:C201739，該細(xì)胞表達(dá)的小反芻獸疫病毒受體?山羊淋巴細(xì)胞信號(hào)活化因子V功能區(qū)具有明顯增強(qiáng)小反芻獸疫病毒復(fù)制的功能，該細(xì)胞通過(guò)過(guò)量表達(dá)小反芻獸疫病毒特定細(xì)胞受體縮短了致細(xì)胞病變后的收毒時(shí)間（從4?7d縮短到3?4d），提高了小反芻獸疫病毒毒價(jià)（ct值從20.19提高到17.01），同體積病毒拷貝數(shù)也得到了大幅度增加（拷貝數(shù)從5.6X106提高到4.9X108），同時(shí)節(jié)約了成本。為小反芻獸疫病毒分離及疫苗毒生產(chǎn)提供了良好工具，也為小反芻獸疫病毒致病機(jī)制研究提供細(xì)胞模型。本發(fā)明還提供了該細(xì)胞的制備及應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物學(xué)領(lǐng)域中細(xì)胞系的建立，特別涉及小反芻獸疫病毒受體細(xì)胞系的構(gòu)建及應(yīng)用，具體說(shuō)是一種基于小反芻獸疫病毒受體的細(xì)胞BHK/slam/v。該細(xì)胞系命名為BHK/Slam/V，于2017.7.6保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(中國(guó)武漢武漢大學(xué))，保藏編號(hào)：CCTCC NO:C201739。

背景技術(shù)

小反芻獸疫(Peste des petits ruminants,PPR)由小反芻獸疫病毒(Peste despetits ruminants virus，PPRV)引起綿、山羊，尤其羔羊發(fā)熱、口炎、腹瀉、肺炎等為特征的急性、熱性高度接觸性傳染病。2007年，小反芻獸疫首次傳入我國(guó)西藏阿里地區(qū)，農(nóng)業(yè)部會(huì)同當(dāng)?shù)卣⒓床扇∮行Т胧杆倏刂屏艘咔椤?013年11月底，小反芻獸疫再次傳入我國(guó)，疫情波及多個(gè)省份。該病是OIE法定報(bào)告動(dòng)物疫病，也是全球計(jì)劃根除的動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。農(nóng)業(yè)部2015年12月24日印發(fā)《全國(guó)小反芻獸疫消滅計(jì)劃(2016—2020年)》的通知。各地畜牧獸醫(yī)部門(mén)迅速行動(dòng)，疫情得到有效控制，最大程度降低了疫情造成的損失。2016年，全國(guó)所有省份完成本行政區(qū)域內(nèi)小反芻獸疫總體狀況評(píng)估。免疫省份繼續(xù)實(shí)施免疫，福建、海南等非免疫省份繼續(xù)做好監(jiān)測(cè)監(jiān)管工作。到2018年，全國(guó)所有免疫省份達(dá)到免疫無(wú)小反芻獸疫區(qū)(以下簡(jiǎn)稱免疫無(wú)疫區(qū))標(biāo)準(zhǔn)，并對(duì)所有免疫省份開(kāi)展退出免疫風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估；根據(jù)評(píng)估結(jié)果，全國(guó)逐步退出免疫。非免疫省份達(dá)到非免疫無(wú)小反芻獸疫區(qū)(以下簡(jiǎn)稱非免疫無(wú)疫區(qū))標(biāo)準(zhǔn)。

到2020年，除毗鄰小反芻獸疫疫情國(guó)家的陸地邊境縣(團(tuán)場(chǎng))或沿邊境線30公里范圍內(nèi)的免疫隔離帶以外，力爭(zhēng)全國(guó)達(dá)到非免疫無(wú)疫區(qū)標(biāo)準(zhǔn)。(http://www.moa.gov. cn/govpublic/SYJ/201512/t20151225_4966587.htm)要實(shí)現(xiàn)此目標(biāo)，任重道遠(yuǎn)。研究此病，分離到病毒是靶向研究的基礎(chǔ)和關(guān)鍵，而找到合適的靶標(biāo)細(xì)胞是首當(dāng)其沖之事。目前生物學(xué)公知領(lǐng)域的細(xì)胞要么病毒不易適應(yīng)，要么病毒細(xì)胞毒價(jià)較低，有些細(xì)胞，病毒還沒(méi)有適應(yīng)傳幾代，就檢測(cè)不到病毒，嚴(yán)重影響和限制了對(duì)PPRV田間采集毒株的分離、鑒定，以及生物學(xué)特性和致病機(jī)制等的研究。