[發明專利]一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法及其應用

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• 申請號: 201810934722.2
• 申請日: 2018-08-16
• 公開（公告）號: CN109097352A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 于洪文;徐興健;李海彥;郭娜;曾影
• 申請（專利權）人: 中國科學院東北地理與農業生態研究所
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C02F3/34;C12R1/385;C02F101/32
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 賈澤純

1.一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物直接耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法具體是按以下步驟進行的：一、分別配置溶液A和脲溶液，然后混合，充分攪拌后，置于反應釜中，于100-120℃條件下處理20-28h，離心收集固相，并依次用去離子水和無水乙醇各洗滌3-4次，干燥后得到CoAl-LDH；其中溶液A包含Al(NO₃)₃·9H₂O和Co(NO₃)₂·6H₂O，溶液A中Al(NO₃)₃·9H₂O的濃度為0.1M，Co(NO₃)₂·6H₂O的濃度為0.2M；

二、將Pseudomonas aeruginosa JLC1菌株在LB固體平板上進行劃線分離培養，挑選單菌落轉接至不含瓊脂的LB液體培養基中，于34-36℃條件下培養14-18h，收集培養物，然后在4℃和5000r/min的條件下離心4-6min，再用無菌生理鹽水洗滌菌體沉淀3-4次，離心收集菌體沉淀，然后用無菌磷酸緩沖液重懸菌體，使菌液OD₆₀₀為1.0，4℃保存備用；

三、取步驟一制備的CoAl-LDH加入到步驟二無菌磷酸緩沖液重懸的菌液中，于28-32℃和170-190rpm條件下，孵育1.5-2.5h，然后將培養物于4℃和5000r/min條件下離心4-6min，收集沉淀，并將沉淀層中的粉色層棄掉，再利用無菌磷酸緩沖液洗滌沉淀3-4次，離心收集沉淀，去掉粉色層，保留菌體層，得到JLC1-CoAl-LDH復合物，即完成鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備。

2.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟一中脲溶液的濃度為1M，溶液A和脲溶液是按體積比1:1的比例混合的。

3.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟二中LB固體平板的配方為：10g/L NaCl、10g/L胰蛋白胨、5g/L酵母提取物和1.5g/L瓊脂。

4.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟二中洗滌后離心收集菌體沉淀的離心條件為：在4℃和5000r/min下離心4-6min。

5.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟二中無菌生理鹽水的質量濃度為0.85％。

6.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟二中無菌磷酸緩沖液配方為：1.81g/L Na₂HPO₄·2H₂O，0.24g/L K₂HPO₄，0.08g/L NaCl和0.20g/L KCl，pH 7.0。

7.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟三中在30℃和180rpm條件下，孵育2h。

8.根據權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的制備方法，其特征在于步驟三中CoAl-LDH和菌液的質量體積比為0.1g:20mL。

9.如權利要求1所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的應用，其特征在于鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統應用于凈化有機污染的水體。

10.根據權利要求9所述的一種鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統的應用，其特征在于鈷鋁層狀雙金屬氫氧化物和微生物耦聯凈化十六烷烴系統應用于凈化富含十六烷烴有機污染的水體。