[發明專利]人子宮內膜組織來源內皮祖細胞的分離培養方法

有效

• 申請號: 201810930216.6
• 申請日: 2018-08-15
• 公開（公告）號: CN109055300B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 解軍;李仁科;范雪梅;宋慧芳;何生;平毅
• 申請（專利權）人: 山西醫科大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;A61K35/36;A61P9/10
• 代理公司: 北京永新同創知識產權代理有限公司 11376
• 代理人: 欒星明;崔依同

本發明涉及一種人子宮內膜組織來源內皮祖細胞，該子宮內膜組織來源的內皮祖細胞是從人的子宮內膜組織中分離得到。通過酶解法消化人體子宮內膜組織獲得單細胞懸液后，采用密度梯度離心法分離得到包含有內皮祖細胞的細胞群，接種于內皮祖細胞培養基中，進行培養及傳代純化，最終獲得了新的具有超強血管新生能力的內皮祖細胞。實驗證實，這種內皮祖細胞具有自我增殖和克隆樣生長能力，具有內皮祖細胞表面標志物，并具有攝取Dil?ac?LDL和與FITC?UEA?1結合及體外形成管狀結構的能力，可應用于制備預防或治療缺血性疾病的藥物。

技術領域

本發明涉及一種新的內皮祖細胞，特別是一種從人體子宮內膜組織中提取的具有強成血管能力的內皮祖細胞。本發明還涉及該子宮內膜內皮祖細胞的分離培養方法。

背景技術

近些年隨著人們生活水平、生活習慣的改變，包括心腦血管疾病在內的各種缺血性疾病的患病人數及引發的醫療社會問題呈現持續增長的態勢，其發病率高，致死率、致殘率高，成為危害人類健康的主要疾病。

所謂缺血性疾病，是一種由于血管狹窄或閉塞導致組織灌注不良，從而造成缺血局部組織細胞供血不足，缺血損傷、壞死，進而對局部乃至全身組織器官的損傷。針對缺血性疾病，現有的治療手段主要是藥物治療，介入治療以及外科手術治療，主要目的是恢復缺血局部的組織供血，并在多數患者中獲得了較好的治療效果，大大改善了缺血性疾病患者的預后。然而這些治療方法仍然具有各自的局限性，如藥物治療的時間限制，介入治療的復發，外科手術治療的風險性等等，使得此類疾病的致死、致殘率依然居高不下。因此迫切需要積極探討針對缺血性疾病，尤其是對傳統療法效果欠佳人群，的新的、更為安全有效的治療策略，以補充和完善現有治療手段。

各種缺血性疾病引起組織損傷的根本是局部組織灌注不良，造成缺血局部組織細胞供血不足。促進患者自身缺血局部血管新生，無疑是靶向其發病根本的策略。事實上，正常人體中即存在有血管新生的過程，作為機體對缺血、缺氧損傷的自身代償性機制。在缺血性疾病的早期，如心肌缺血早期，局部毛細血管密度代償性增加，在梗阻血管周圍形成新生血管，建立新的側支循環，都是機體應對缺血損傷的自我修復和保護過程。只是在缺血性疾病加重進展的過程中，這種自我修復不足以抗衡損傷，從而導致局部組織細胞缺血乃至壞死。因此，增強血管新生，促使損傷與血管新生修復的天平向修復的方向傾斜，是治療缺血性疾病的關鍵。

治療性血管新生成為治療缺血性疾病的新理念。各種促進患者血管新生的途徑中，干細胞及干細胞移植方面的深入研究為其提供了希望。

干細胞/祖細胞是一種具有自我復制、更新和多向分化潛能的細胞，具有修復受損組織細胞的潛能，近年來已成為疾病治療和組織工程領域理想的種子細胞，是各種疾病尤其是各種難治性疾病可能的新的有效治療方法。

根據發育階段不同，干細胞又分為胚胎干細胞和成體干細胞，其中成體干細胞因其來源廣泛，致瘤性相對較低等特點，具有廣泛的應用前景。

祖細胞較干細胞具有更明確的定向分化能力，其中內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞，能夠自我增殖并具有向血管內皮細胞定向分化的能力，在各種生理及病理因素的刺激下，具有非常重要的參與損傷血管修復的作用。研究表明，內皮祖細胞在包括心血管疾病、腦血管疾病、外周血管疾病等多種血管損傷的修復過程中發揮著重要作用，已成為各種缺血性疾病的新的治療思路。但是，現有內皮祖細胞的來源有限、血管新生能力有限等各方面的問題依然存在。

發明內容

本發明的目的是提供一種新的具有超強血管新生能力的人子宮內膜組織來源內皮祖細胞。

提供所述人子宮內膜組織來源內皮祖細胞的分離培養方法，是本發明的另一發明目的。

本發明的目的還在于提供所述新的內皮祖細胞的應用。

發明人注意到一種有趣的臨床現象：絕經前女性的心血管事件發生率明顯低于同年齡段的男性，但女性這種發病率低的優勢會在絕經后喪失。這一現象為我們治療缺血性疾病帶來了新的希望。