[發(fā)明專利]一種馬來酸異構(gòu)酶突變體及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810914716.0
• 申請(qǐng)日: 2018-08-13
• 公開（公告）號(hào): CN110819616B
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任麗梅;李鶴;朱科;李紅飛;楚偉冬;王艷艷;袁國強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 石藥集團(tuán)圣雪葡萄糖有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C12N9/90
• 分類號(hào): C12N9/90;C12P13/20
• 代理公司: 北京瑞恒信達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11382
• 代理人: 張偉

1.一種馬來酸異構(gòu)酶突變體，所述馬來酸異構(gòu)酶突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述的馬來酸異構(gòu)酶突變體的核酸分子。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列如SEQ IDNO.4所示。

4.包含權(quán)利要求2或3所述的核酸分子的載體。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的載體，其特征在于，所述載體為重組載體。

6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的載體，其特征在于，所述載體為重組表達(dá)載體。

7.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的載體，其特征在于，所述載體為用于在細(xì)菌中表達(dá)的重組表達(dá)載體。

8.包含權(quán)利要求4至7中任一項(xiàng)所述的載體的宿主細(xì)胞。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為用于從所述載體表達(dá)所述馬來酸異構(gòu)酶突變體的宿主細(xì)胞。

10.根據(jù)權(quán)利要求8或9所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為細(xì)菌細(xì)胞。

11.權(quán)利要求1所述的馬來酸異構(gòu)酶突變體、權(quán)利要求2或3所述的核酸分子、權(quán)利要求4至7中任一項(xiàng)所述的載體或者權(quán)利要求8至10中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞在催化馬來酸異構(gòu)化生成富馬酸中的應(yīng)用。

12.權(quán)利要求1所述的馬來酸異構(gòu)酶突變體、權(quán)利要求3或2所述的核酸分子、權(quán)利要求4至7中任一項(xiàng)所述的載體或者權(quán)利要求8至10中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞在以馬來酸為底物生產(chǎn)L-天冬氨酸中的應(yīng)用。

13.一種基因構(gòu)建體，所述基因構(gòu)建體包含編碼L-天冬氨酸氨裂解酶的基因序列和編碼馬來酸異構(gòu)酶突變體的基因序列，其中所述馬來酸異構(gòu)酶突變體的氨基酸序列如SEQ IDNO.3所示。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的基因構(gòu)建體，其特征在于，所述基因構(gòu)建體還包含核糖體結(jié)合序列，所述核糖體結(jié)合序列的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。

15.一種載體，所述載體包含權(quán)利要求13或14所述的基因構(gòu)建體。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的載體，其特征在于，所述載體為重組載體。

17.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的載體，其特征在于，所述載體為重組表達(dá)載體。

18.根據(jù)權(quán)利要求15或16所述的載體，其特征在于，所述載體為用于在細(xì)菌中表達(dá)的重組表達(dá)載體。

19.包含權(quán)利要求15至18中任一項(xiàng)所述的載體的宿主細(xì)胞。

20.根據(jù)權(quán)利要求19所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為用于從所述載體表達(dá)所述L-天冬氨酸氨裂解酶和所述馬來酸異構(gòu)酶突變體的宿主細(xì)胞。

21.根據(jù)權(quán)利要求19或20所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為細(xì)菌細(xì)胞。

22.權(quán)利要求13或14所述的基因構(gòu)建體、權(quán)利要求15至18中任一項(xiàng)所述的載體或者權(quán)利要求19至21中任一項(xiàng)所述的宿主細(xì)胞在以馬來酸為底物生產(chǎn)L-天冬氨酸中的應(yīng)用。