[發明專利]一種牛角瓜組培快繁方法

有效

• 申請號: 201810909980.5
• 申請日: 2018-08-10
• 公開（公告）號: CN108849523B
• 公開（公告）日: 2019-11-12
• 發明（設計）人: 蘇江;黃寧珍;冼康華;何金祥;付傳明;黃惠錦
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

1.一種牛角瓜組培快繁的方法，包括以下步驟：

1)以牛角瓜幼嫩組織為外植體，消毒后接種于初代誘導培養基中進行誘導培養，得初代芽苗；所述初代誘導培養基為：蔗糖25～35g·L^-1和瓊脂3.4～4g·L^-1+MS培養基；所述誘導培養為光照培養，所述光照培養的光照時間為10～15h/d，光照強度為35～45μmol·m^-2·s^-1，所述誘導培養的溫度為22～32℃，所述誘導培養的時間為20～28d；所述牛角瓜幼嫩組織為帶腋芽的莖段；

2)將步驟1)得到的所述初代芽苗裁成包含1～2個腋芽的莖段，置于繼代培養基中進行繼代培養，得叢生苗；所述繼代培養基為：6-BA 0.5～2.2mg·L^-1、NAA 0.02～0.15mg·L^-1、AgNO₃ 0.5～2.5mg·L^-1、蔗糖25～35g·L^-1和瓊脂3.4～4g·L^-1+MS培養基；所述繼代培養為光照培養，所述光照培養的光照時間10～15h/d，光照強度為35～45μmol·m^-2·s^-1，所述繼代培養的溫度為22～32℃，所述繼代培養的時間為21～30d；

3)將步驟2)得到的所述叢生苗置于生根培養基上進行生根培養，得牛角瓜組培快繁苗；所述生根培養基為：NAA 0.5～1.5mg·L^-1、蔗糖15～25g·L^-1和瓊脂3.4～4g·L^-1+1/2MS培養基；所述生根培養為光照培養，所述光照培養的光照時間為10～15h/d，光照強度為35～45μmol·m^-2·s^-1，所述生根培養的溫度為22～32℃，所述生根培養的時間為10～20d。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟1)所述消毒包括：將外植體置于質量濃度為1～2％的洗潔精水溶液中浸泡5min，取出后沖洗干凈，再置于體積濃度為70～75％的乙醇水溶液中浸泡50～70s，取出后再置于質量濃度為0.1～0.2％的HgCl₂水溶液中浸泡5～10min，取出，無菌水清洗3～5次。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟3)所述生根培養后，還包括煉苗和移栽。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述煉苗為將牛角瓜組培快繁苗置大棚中煉苗5～7天，所述大棚的遮陰度為60～80％。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述移栽為將煉苗后的組培快繁苗移栽入基質中，所述基質包括沙壤土和腐殖土。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述沙壤土和腐殖土的體積比為(1～4)：1。