[發明專利]一種導致鴨脾臟壞死的鴨呼腸孤病毒及其滅活疫苗和應用

有效

• 申請號: 201810909234.6
• 申請日: 2018-08-10
• 公開（公告）號: CN108913666B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 刁有祥;唐熠;王鴻志
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/15;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240
• 代理人: 薛鵬喜

本發明公開了一種導致鴨脾臟壞死的鴨呼腸孤病毒及其滅活疫苗和應用，該鴨呼腸孤病毒已于2018年7月18日保藏于中國典型培養物保藏中心，其保藏編號為：CCTCC NO：V201843。本發明提供的鴨呼腸孤病毒對目前流行的以脾臟壞死為主要病癥的鴨呼腸孤病毒具有很好的免疫原性。以本發明的鴨呼腸孤病毒株制備的滅活疫苗安全性好，保護率達100％，能夠對新分離的變異株提供完全保護。

技術領域

本發明涉及獸用生物制品技術領域領域，具體涉及一種導致鴨脾臟壞死的鴨呼腸孤病毒及其滅活疫苗和應用。

背景技術

呼腸孤病毒的基因組為雙股分節段的RNA，1978年國際病毒分離委員會(ICTV)將其定為呼腸孤病毒科(Reoviridae)，包括呼腸孤病毒屬、環狀病毒屬和輪狀病毒屬。呼腸孤病毒(Avian reovirus)首次在雞的呼吸道內分離得到，感染易感雞后，可表現為肌腱炎、滑膜炎和呼吸道疾病等癥狀。ARV可感染雞、火雞、鴨、鵝、鸚鵡、鴿子等禽類，可引起雞的病毒性關節炎、腱鞘炎，同時也是其他病的病因，包括心肌炎、心包炎、心包積水、肝炎、胸腺萎縮、呼吸道病以及生長受阻等。

2017年起，我國山東、河北、河南、安徽及江蘇等地鴨大范圍爆發以脾臟壞死為主要癥狀的傳染性疾病，該病主要引起各個年齡階段鴨脾臟腫大、出血和壞死，導致種鴨產蛋和肉鴨體重的下降，料肉比升高，肉鴨出欄合格率顯著降低，對肉鴨以及種鴨養殖業造成嚴重經濟損失。

目前對于該傳染性疾病的流行尚無有效的預防或治療措施，常規的抗病毒和抗菌治療方法無效；使用減毒活疫苗或滅活病毒疫苗通過免疫接種來預防該傳染性疾病的發生也是常用的治療手段之一，但前提是需要分離獲得免疫原性良好、效價穩定的病原菌株。

發明內容

針對上述現有技術，本發明的目的是提供一株分離的鴨呼腸孤病毒毒株，采用該毒株制備的滅活疫苗免疫原性好，能夠有效防治目前流行的以鴨脾臟壞死為主要癥狀的傳染性疾病。

具體的，本發明涉及以下技術方案：

本發明的第一方面，提供了一株鴨呼腸孤病毒，該病毒已于2018年7月18日保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC)，地址為：中國武漢，武漢大學，其保藏編號為：CCTCC NO：V201843，分類命名為新型鴨呼腸孤病毒N-DRV-XT18株。

本發明的第二方面，提供上述鴨呼腸孤病毒在制備預防或治療鴨脾臟壞死的疫苗中的應用。

進一步的，所述鴨脾臟壞死是由鴨呼腸孤病毒引起的。

本發明的第三方面，提供一種預防或治療鴨脾臟壞死的疫苗組合物，所述疫苗組合物含有免疫有效量的所述鴨呼腸孤病毒株。

進一步的，所述疫苗組合物中還含有藥學上可接受的佐劑。

優選的，所述疫苗組合物為滅活疫苗或減毒活疫苗；更優選的，所述疫苗組合物為滅活疫苗。

本發明的第四方面，提供一種預防或治療鴨脾臟壞死的滅活疫苗的制備方法，包括以下步驟：

(1)將保藏編號為CCTCC NO：V201843的鴨呼腸孤病毒接種到雞肝癌細胞(LMH) 細胞系中，對鴨呼腸孤病毒進行增殖培養后，通過凍融破碎細胞，收取上清液，并進行純化，獲得鴨呼腸孤病毒株病毒液；

(2)將鴨呼腸孤病毒株病毒液滅活，加入Tween-80混合作為水相，以白油、硬脂酸鋁和Span-80混合作為油相，將水相和油相混合均勻，乳化，得到預防或治療鴨脾臟壞死的滅活疫苗。

優選的，步驟(2)中，鴨呼腸孤病毒株病毒液滅活的方法為：加入終濃度為0.2％的甲醛，37℃攪拌滅活16h。

優選的，步驟(2)中，所述水相中，鴨呼腸孤病毒株病毒液與Tween-80加入的體積比為96:4。