[發明專利]一種獲得高含量甘油葡萄糖苷藻細胞的養殖方法

有效

• 申請號: 201810908060.1
• 申請日: 2018-08-10
• 公開（公告）號: CN108977402B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 呂雪峰;段仰凱;張凱;吳懷之;劉祥
• 申請（專利權）人: 中國科學院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/20;C12P19/44
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 董潔

1.一種獲得高含量甘油葡萄糖苷螺旋藻細胞的養殖方法，其特征是，該方法使用的反應器為100L管式反應器，該方法包括以下步驟：

(1)獲得培養后的藻細胞階段：

將該藻細胞接種于淡水培養基中，初始接種濃度為0.15g/L，控制培養該藻細胞的淡水培養基的溫度程序為：恒溫28℃，光照程序為：持續光照，光照強度為200μE·m^-2·s^-1，光波長范圍為400～700nm，通氣量為：0.2VVM，所通入的氣體為含有二氧化碳的混合空氣，二氧化碳體積濃度為2％，以及向培養基中加入100mmol NaHCO₃；

此階段的培養時間為3-5天；

其中，所述淡水培養基的具體配方為：Zarrouk培養基；

(2)GG生成階段：

藻細胞選用上述步驟(1)培養后成長起來的細胞，控制培養該藻細胞的淡水培養基的溫度程序為：光照時溫度32℃，黑暗時溫度23℃，光照程序為：光暗比為1:1，光暗時長分別為12小時和12小時，光強600μE·m^-2·s^-1，光波長范圍為400～700nm，通氣量為：0.2VVM，所通入的氣體為含有二氧化碳的混合空氣，二氧化碳體積濃度為5％；

其中，所述淡水培養基為步驟(1)中的淡水培養基中加入氯化鈉，使其在淡水培養基中的濃度為150mmol/L；

此階段的培養時間為3-5天；

(3)GG拔高階段一：

該階段的藻細胞特征是經過步驟(2)培養后已經含有一定量的GG，此階段的培養條件與步驟(2)的基本相同，區別在于：淡水培養基為步驟(2)中的淡水培養基中繼續加入氯化鈉，使其在淡水培養基中的濃度為500mmol/L；

此階段的培養時間為3天；

通過步驟(3)培養后，經檢測，可以獲得GG質量含量10％以上的藻細胞；

(4)GG拔高階段二：

對于自養型微藻-螺旋藻，選用與步驟(3)相同培養條件，區別在于：將步驟(3)獲得的微藻細胞接入步驟(4)的新鮮培養基，所述新鮮培養基為含有900mmol氯化鈉的Zarrouk培養基；

此階段的培養時間為3天。

2.一種甘油葡萄糖苷的制備方法，其特征是：該方法包括權利要求1所述的獲得高含量甘油葡萄糖苷螺旋藻細胞的養殖方法。