[發(fā)明專利]刺五加多糖的提取與純化方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810907938.X
• 申請日: 2018-08-10
• 公開（公告）號: CN109021139A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 栗明獻;張一丁;朱雪鵬;張家民;劉林洋;張超
• 申請（專利權(quán)）人: 廊坊市思丁生物科技發(fā)展有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京志霖恒遠知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11435
• 代理人: 朱麗麗

本發(fā)明公開刺五加多糖的提取與純化方法，該技術(shù)方案以刺五加為原料，通過超聲波法、熱水法和酶法進行多糖提取，然后除去蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，通過正交試驗尋找最佳實驗條件，并對HPD826和HPD100兩種樹脂進行了優(yōu)選，吸附多糖，通過紫外等方法進行表征，確定純度以及大孔吸附效果，進而確定了最佳的提取和純化方法，實驗結(jié)果表明，刺五加多糖采用超聲波法提取效果較好，而且采用HPD826樹脂吸附效果較好。本發(fā)明為刺五加多糖的生產(chǎn)與應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)，其制備方法簡單易行，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多糖的提取與純化領(lǐng)域，具體為刺五加多糖的提取與純化方法。

背景技術(shù)

刺五加為五加科植物。

刺五加Acanthopanaxsenticosus(Rupr.et Maxim.)Harms的干燥根和根莖或莖，具有益氣健脾，補腎安神的功效。其性辛、微苦，溫。刺五加中的主要活性成分為黃酮類、皂苷類及多糖類化合物，其中刺五加中的多糖能增強機體免疫力，對腫瘤有較強的抑制作用。

目前，多糖類化合物的提取技術(shù)常用的有熱水提取、水提醇沉、堿提、酸提、微波提取、超聲提取法，但針對刺五加多糖的提取純化方法較少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所解決的技術(shù)問題在于提供刺五加多糖的提取與純化方法，能夠提高提取的濃度和純度。

為實現(xiàn)以上技術(shù)目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

刺五加多糖的提取與純化方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

1)粉碎：粉碎成絮狀；

2)提取與純化

(1)提取方法：超聲波法提取

稱取5g粉碎料，以料液比1:20配置成水溶液，在超聲儀中進行超聲提取；

(2)去蛋白質(zhì)

Sevage法去蛋白質(zhì)：將提取液與有機浸提劑4:1混合，劇烈震蕩20-30min，在3000r/min條件下離心15min，分去水層和有機層交界處變性蛋白質(zhì)，除去沉淀，保留水層，重復(fù)多次，獲得分離液；

3)干燥。

作為優(yōu)選，所述步驟2)提取與純化(1)提取方法：超聲波提取方法中，超聲波提取條件為溫度：70℃，超聲波功率：320W，超聲波提取時間：2小時。

作為優(yōu)選，所述有機浸提劑為體積比5:1的氯仿：正丁醇溶液。

作為優(yōu)選，所述步驟2)提取與純化(1)提取方法還可以用熱水法提取：稱取5g粉碎料，投入至水浴鍋料液比1：15(去離子水)，90℃恒溫蒸餾2h，放出煎液，殘渣仍留于鍋中，再加入15倍量的去離子水，與第一次操作一樣，放出第2次煎液，與第一次合并，獲得初提液，將初提液放入燒杯，靜置過夜，分離獲得提取液。

作為優(yōu)選，所述步驟2)提取與純化還可以用酶法進行提取與純化：(1)稱取5g粉碎料，投入至水浴鍋料液比1：6(去離子水)，90℃恒溫蒸餾1h；(2)水浴鍋降溫至45℃，加入酶液，并攪拌均勻，45℃保溫1h；(3)水浴鍋升溫至100℃并保持1分鐘以殺死酶；(4)80目過濾取濾液；(5)殘渣加10倍水量，100℃保持2h，80目過濾；(6)將兩步濾液合并，靜置過夜，取上清液。

作為優(yōu)選，所述(2)中酶液包括纖維素酶1.5％，木瓜蛋白酶0.8％，菠蘿蛋白酶3.5％。

作為優(yōu)選，還包括大孔樹脂靜態(tài)吸附進一步純化：

HPD826樹脂進行預(yù)處理；取預(yù)處理后的HPD826和步驟2)中最終獲得的液體，在120次/min，25℃條件下震蕩12h，進行吸附提取。