[發明專利]一種新型血清特定糖蛋白的抗體制備方法

在審

• 申請號: 201810905323.3
• 申請日: 2018-08-09
• 公開（公告）號: CN108976301A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 高春芳;馮惠娟;衣常紅;房萌
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學東方肝膽外科醫院;高春芳
• 主分類號: C07K16/42
• 分類號: C07K16/42;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種新型血清特定糖蛋白的抗體制備方法，該方法是基于基因工程改構的血清特定糖蛋白的抗體制備方法，其特征在于該方具體包括以下步驟：

(1)采用細胞融合技術與抗體庫技術篩選血清特定糖蛋白的特異性抗體；

(2)通過基因構建與原核體系表達血清特定糖蛋白的乏糖基化抗體；

(3)通過基因構建、改構與真核體系表達血清特定糖蛋白的乏糖基化抗體。

2.權利要求1所述的血清特定糖蛋白，包括11種血清高豐度糖蛋白(免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgE)、α-1抗胰蛋白酶、轉鐵蛋白、觸珠蛋白、纖維蛋白原、α2-巨球蛋白、α1-酸性糖蛋白、轉甲狀腺素蛋白及補體-C3)與2種血清中豐度蛋白(胎球蛋白及高爾基體蛋白73)。

3.權利要求1所述的細胞融合技術與抗體庫技術，包括雜交瘤單克隆抗體法與小鼠免疫源噬菌體展示抗體庫法。

4.權利要求1所述的表達體系，包括原核表達體系與真核表達體系。

5.權利要求1所述的基因改構，主要基于抗體肽鏈的N-糖基化位點基因序列突變進行的改構。

6.權利要求1-5所得抗體，用于建立基于凝集素捕獲的免疫學檢測技術(凝集素捕獲化學發光免疫技術及凝集素酶聯免疫吸附試驗等)，定量檢測血清特定糖蛋白的異常糖基化組份。可應用于多種疾病(原發性肝細胞癌、結直腸癌、胰腺癌等多種腫瘤、肝硬化、自身免疫性疾病等)的篩查及診斷。