[發明專利]一種可降解重質原油的石油降解菌及其分離方法與應用

有效

• 申請號: 201810896351.3
• 申請日: 2018-08-08
• 公開（公告）號: CN108949634B
• 公開（公告）日: 2022-03-08
• 發明（設計）人: 余冉;張曉東;祝沖之;祝欣;石佳奇;王磊;陳檣;段丹陽;侯登峰;賀夢凡;張靜;董浩宇
• 申請（專利權）人: 東南大學;環境保護部南京環境科學研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 盧倩

本發明屬于微生物及環保技術領域，特別涉及一種可降解重質原油的石油降解菌及其分離方法與應用，該石油降解菌在分類學上屬于蒼白桿菌屬(Ochrobactrum sp.)，已于2018年5月7日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，菌種保藏號為CGMCCNo.15739；該石油降解菌可以在常規條件下以瀝青和膠質含量較高的重質原油為唯一碳源進行生長，并對石油污染物進行降解去除，無須人為添加能源、碳源、熱源等，工藝要求低，應用成本低，且不產生二次污染；在7d內對重質原油的降解率即可達到20％以上，降解效率高，可迅速降解環境中的石油污染物，用于石油污染土壤或水體的生物修復，亦可用于與其他菌株共同制備復合菌劑，以用于高效徹底去除環境中的石油污染物。

技術領域

本發明屬于微生物及環保技術領域，特別涉及一種可降解重質原油的石油降解菌及其分離方法與應用。

背景技術

石油是現代社會的最主要能源之一。在石油的勘探、開采、儲運和使用過程中的發生的泄漏事故，會造成嚴重的環境危害。石油進入土壤，會破壞土壤結構和性質，降低土壤活性，破壞土壤生態系統；石油烴的部分揮發性有機物會影響人體健康，有些成分有致癌、致突變、致畸的作用。傳統的物理、化學等方法來解決石油污染問題不僅費用昂貴，而且易造成二次污染，其應用受到了一定的限制，而微生物降解技術因其經濟高效、操作簡單、無二次污染等特點倍受關注。

微生物降解技術是指在適宜環境下通過微生物各種代謝途徑將污染物降解的技術。大量研究表明,在石油烴類污染的自然降解中,微生物降解起著重要的作用。向石油污染的水體或土壤中投加環境適應性強、降解效能高的菌種或菌群是提高石油降解效率的重要技術手段。微生物好氧代謝過程中能夠降解大部分飽和脂肪烴和芳香烴，脂肪烴在單氧化酶和脫氫酶的作用下生成脂肪酸，而芳香烴則在氧化酶和水解酶的作用下轉化成二氫二醇。

已有的石油降解微生物的篩選主要關注汽油和柴油等成品油，對于成分更復雜、降解更困難的原油關注較少。然而，已有研究表明，單一的降解菌對石油烴的底物利用能力有限，在自然界中，沒有一種有代謝能力的單一菌種能夠降解原油中的所有組分，且原油中含有膠質和瀝青質等結構復雜的重質成分，不易被生物所降解。因此，篩選底物利用范圍多樣的石油降解菌，尤其是可降解重質組分的石油降解菌，為復合菌劑的開發提供新的菌株，是提高石油綜合降解效率的關鍵所在。

發明內容

本發明的第一個目的是提供一種石油降解菌，該菌株可對石油污染物進行降解去除；

本發明的第二個目的是提供一種石油降解菌菌劑；

本發明的第三個目的是提供了石油降解菌的分離方法；

本發明的第四個目的是提供了石油降解菌或石油降解菌菌劑在降解石油中的應用。

本發明的技術方案如下：

一種石油降解菌，在分類學上屬于蒼白桿菌屬(Ochrobactrum sp.)，已于2018年5月7日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，菌種保藏號為CGMCCNo.15739，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

一種石油降解菌菌劑，包含石油降解菌CGMCCNo.15739。

一種可降解重質原油的石油降解菌的分離方法，包括以下步驟：

步驟1，取石油污染土壤樣品，加入超純水，震蕩使土壤充分打散，靜置沉淀；

步驟2，取步驟1的上清液加入石油液體培養基中，在搖床培養；

步驟3，按5％接種，重新轉接入新鮮的石油液體培養基中，連續轉接富集培養；

步驟4，將步驟3得到的富集培養菌液分離純化，得到所述石油降解菌。