[發明專利]一種鑒定三門地區養殖青蟹的方法

有效

• 申請號: 201810895346.0
• 申請日: 2018-08-08
• 公開（公告）號: CN109022601B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 王春琳;王歡;唐蕾;韋紅玲;母昌考
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11
• 代理公司: 青島海昊知識產權事務所有限公司 37201
• 代理人: 曾慶國

本發明提供一種三門青蟹的鑒定方法，是通過檢測青蟹腸道微生物中是否存在Psychrilyobacter屬微生物的核苷酸片段來確定；所述的核苷酸片段，為16S rDNA片段，其核苷酸序列為SEQ ID NO:4。本發明采集中國東南沿海各省青蟹養殖的主產地的青蟹，最后篩選出三門青蟹特異的微生物種群，并將這些種群的特征DNA序列進行綜合設計，獲得鑒別三門青蟹的“分子指紋圖譜”，并開發成試劑盒，從而解決了三門青蟹鑒定的難題。

技術領域

本發明屬于蟹類鑒定技術領域，具體涉及一種鑒定三門地區養殖青蟹的方法。

背景技術

海洋蟹類的種類資源非常豐富，僅在印度-太平洋區的蟹類就有2000多種，我國的蟹類約占其中的三分之一。目前我國人工增養殖規模較大的蟹類只有3個種：中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis)、三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)及擬穴青蟹(Scyllaparamamosain)。其中中華絨螯蟹為淡水蟹，后兩者為海水蟹類。前兩者在我國沿海均有分布，而擬穴青蟹在我國分布于熱帶亞熱帶的東南沿海，其中最為著名的當屬浙江三門青蟹，享有“三門青蟹，橫行世界”的美譽。

擬穴青蟹隸屬節肢動物門(Arthropoda)，甲殼綱(Crustacea)，十足目(Decapoda)，梭子蟹科(Protuninae)，擬穴青蟹屬(Scylla)；擬穴青蟹屬包括四個種：擬穴青蟹(Scylla paramamosain)、欖綠青蟹(Scylla olivacea)、紫螯青蟹(Scyllatranquebarica)、鉅緣青蟹(Scylla serrata)。林琪(等人根據四種擬穴青蟹的形態學特征及其mtDNA COI基因序列對我國東南沿海的擬穴青蟹進行了分析，結果表明中國擬穴青蟹屬的優勢種為擬穴青蟹，且擬穴青蟹在中國大陸東南沿海分布最廣、數量最多，其他3個種僅在海南和北部灣被發現。

據2016年中國漁業統計年鑒，2015年全國擬穴青蟹養殖總產量141040噸，同比2014年增長了0.21％，浙江產量占全國的19％；總捕撈量為83766噸，浙江捕撈量約占全國捕撈量的5％。擬穴青蟹的產量，無論是海洋捕撈還是海水養殖，浙江省的擬穴青蟹產量均不是全國最高，但由于三門青蟹本身味道鮮美，品牌價值極高，并列為浙江省農產品第一品牌。因此，浙江三門灣地區的“三門青蟹”成為市場上知名度最高的商品青蟹。

三門青蟹在繁榮發展的同時，也出現了一些有損品牌名譽的問題。由于三門青蟹在江浙滬地區供不應求，價格較高，很多來自福建、廣東、越南等地的擬穴青蟹運至各地冒名三門青蟹出售，這不但影響了三門當地青蟹產業的良性發展，還損害了三門青蟹的美名。因此，如何區分三門青蟹與其他地區擬穴青蟹的問題油然而生。然而，從外觀辨識，不易辨別，也很不穩定，尤其可以通過化學處理使其外觀相同。從生物學角度，都是亟待解決的問題。

發明內容

本發明的目的是提供一種三門青蟹的鑒定方法，從而彌補現有技術的不足。

本發明首先提供一種檢測三門青蟹的方法，所述的方法是通過檢測青蟹腸道微生物中是否存在Psychrilyobacter屬微生物的核苷酸片段來確定；

所述的核苷酸片段，為16S rDNA片段，其核苷酸序列為SEQ ID NO:4；

所述的核苷酸片段，是使用擴增引物對待檢測青蟹腸道微生物樣品進行體外擴增獲得的；

其中引物對，其上下游引物的序列為SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；

更進一步的，所述的檢測方法，還檢測Mycoplasmataceae屬微生物的核苷酸片段；

所述的Mycoplasmataceae屬微生物的核苷酸片段，為16S rDNA的DNA序列，其核苷酸序列為SEQ ID NO:1；