[發明專利]一種可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質

在審

• 申請號: 201810890025.1
• 申請日: 2018-08-07
• 公開（公告）號: CN108635623A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 劉曉紅;吳昊;徐志云;夏翠萍
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第二軍醫大學
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36;A61L27/50;A61L27/54;A61L27/56
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司 31204
• 代理人: 郁旦蓉

本發明提供了一種可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質，具有這樣的特征：可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質具有微孔結構以及附著在微孔結構表面的生物活性因子，微孔結構為海綿狀，微孔結構的微孔的形狀為圓形或橢圓形，可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質的微孔大小不一，最大直徑可達50μm，其中，生物活性因子為具有生物活性的生長因子，可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質通過將牛心包在真空條件下置于非離子型去污劑緩沖液中進行多次凍融后再依次在非離子型去污劑緩沖液、無菌去離子水以及磷酸鹽溶液中進行震蕩清洗，最后浸沒在生物活性因子瓊脂糖材料中得到的。

技術領域

本發明涉及組織工程領域，具體涉及一種可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質。

背景技術

組織工程是將活細胞接種在組織基質上，制造出一種與受者組織相容性好，無免疫原性、不需抗凝、耐久性強的生物材料。其中，天然基質材料是組織工程研究的重要內容之一。理想的天然基質材料應具備以下優點：(1)良好的組織相容性，無生物毒性；(2)具有三維立體結構，材料需呈多孔海綿狀，有利于細胞粘附浸潤，以及營養物質的深入和代謝產物的排泄；(3)富含生物活性因子，為宿主細胞生長提供良好的微環境；(4)具有良好的機械性能，能抵抗體內血液等流體沖刷。

目前，組織工程基質材料主要分為人工高分子生物合成材料和天然基質材料兩類。人工高分子生物合成材料組織相容性差、體內組織重塑不良，故限制了其廣泛應用。而天然基質材料，例如牛心包因其來源廣泛、具有良好的張力強度、易于塑形和縫合等優點，而廣泛用于生物型人工心臟瓣膜、人工血管的制備以及各種組織器官缺損的修補材料。在當前的應用過程中，常用戊二醛對牛心包中的細胞和基質進行交聯固定，以達到降低免疫原性、減輕異物反應、穩定膠原基質、增強抗酶解能力以及達到對材料進行消毒、保存的目的。盡管這種處理的牛心包在臨床上已經獲得很大成功，但戊二醛并不能完全封閉異種抗原，殘留抗原所引起的免疫排斥反應以及戊二醛所致的鈣化是導致構建組織器官失功、影響其臨床使用壽命的主要原因之一。另外戊二醛具有生物毒性，導致宿主細胞不易生長，體內重塑性差。

因此，研發無免疫原性、組織相容性和力學性能優良，在結構上呈多孔海綿狀、富含生物活性分子的牛心包基質材料對解決當前牛心包臨床應用瓶頸至關重要。脫細胞是組織工程研究中降低移植組織免疫原性、保留移植物三維組織結構和生物力學性能的重要方法。其中，去污劑是最常用的脫細胞試劑，其可分為離子型和非離子型去污劑兩種。雖然離子型去污劑能取得良好的脫細胞效果，但是殘存毒性、易去除可溶性的生物活性因子、基質材料結構致密等導致細胞很難內生性生長，在宿主體內重塑效果不佳，這成為限制其處理臨床組織標本的瓶頸。

發明內容

本發明是為了解決上述問題而進行的，目的在于提供一種可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質。

本發明提供了一種可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質，具有這樣的特征：可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質具有微孔結構以及附著在微孔結構表面的生物活性因子，微孔結構為海綿狀，微孔結構的微孔的形狀為圓形或橢圓形，可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質的微孔大小不一，最大直徑可達50μm，其中，生物活性因子為具有生物活性的生長因子，可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質通過將牛心包在真空條件下置于非離子型去污劑緩沖液中進行多次凍融后再依次在非離子型去污劑緩沖液、無菌去離子水以及磷酸鹽溶液中進行震蕩清洗，最后浸沒在生物活性因子瓊脂糖材料中得到的。

在本發明提供的可緩釋生物活性因子的微孔隙脫細胞牛心包基質中，還可以具有這樣的特征：其中，非離子型去污劑緩沖液包括：Tris緩沖液、非離子型去污劑以及脫氧膽酸鈉，Tris緩沖液的物質的量濃度范圍為8～12mmol/L，PH值為7.4～7.8，非離子型去污劑在Tris緩沖液的體積分數范圍為0.8％～1.5％W/V，脫氧膽酸鈉在Tris緩沖液的體積分數范圍為0～0.8％W/V。