[發明專利]一種鐵皮石斛快速成苗的方法

在審

• 申請號: 201810879671.8
• 申請日: 2018-08-03
• 公開（公告）號: CN109197585A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 邵麗麗;劉琴
• 申請（專利權）人: 南京龍源生態農業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種鐵皮石斛快速成苗的方法，其特征在于：所述培養步驟包括如下：

1）取材與消毒

從鐵皮石斛植株上切下長2～5cm的幼嫩莖段，在流水下沖洗，用刷子蘸少許洗衣粉水溶液輕輕刷洗，并經自來水充分洗凈，在超凈工作臺上將莖段放置在75%的酒精中消毒30s后，再用0.1%的HgCl2水溶液浸泡8～10min，無菌水沖洗5～6次；

2）誘導培養

誘導培養：用解剖刀將鐵皮石斛的幼嫩莖段切下，接種在誘導培養基中進行培養；15～20天后，外植體開始萌動，莖段膨大，切面及頂部組織形成疏松組織；繼續培養20天后，轉入微放置室中，切面及頂部膨大組織的表面形成凹凸不平的顆粒物，隨著培養時間的延長，顆粒物長大形成直徑1～2mm的類原球莖顆粒物；培養條件為25℃，光照為1900 ~2200lx，光照時間為14h/d；

3）增殖分化培養

將誘導形成的原球莖轉入到增殖分化培養基中，同時部分原球莖開始分化出芽點并長出1～2片小葉，原球莖的增殖與芽分化同時進行；：溫度26℃，光照度2200~2500lx，光照時間為13h/d；

4）生根培養

待增殖芽數量較多時，將高1～2cm、帶有2～3片葉的小芽切下轉入生根培養基上進行生根培養，培養30天左右，基部開始出現2～3條約1cm長的白色根；，培養條件：溫度25-26℃，光照度1700-2100 lx，光照時間為13-14h/d；

5）出瓶苗的過渡管理

當苗高3cm以上、具3～4片葉時，便可出瓶移栽，移栽前，將生根瓶苗打開瓶蓋，然后將瓶苗取出，洗去附著在根部的培養基，用 0.01%的高錳酸鉀溶液浸泡8～10min，栽種于已滅菌的碎樹皮基質中，放置在遮光度50%～60%、濕度達80%以上的溫室中。

2.根據權利要求1所述鐵皮石斛快速成苗的方法，其特征在于：所述步驟2）中的誘導培養基由以下組分組成：MS基本培養基，6- 芐氨基腺嘌呤1.6 ～ 2.5mg/L，萘乙酸0.6 ～0.8mg/L，PQQ 0.5 ～ 1.5umol/L，植物提取混合物16 ～28mg/L，蔗糖80 ～ 120 mg/L，培養基功能液5 ～8mg/L。

3.根據權利要求3所述鐵皮石斛快速成苗的方法，其特征在于：所述步驟3）中所述增殖分化培養基由以下組分組成：1/2MS基本培養基，6- 芐氨基腺嘌呤1.6 ～ 2.5mg/L，萘乙酸0.6 ～ 0.8mg/L，PQQ 0.5 ～ 1.5umol/L，植物提取混合物16 ～28mg/L，蔗糖40 ～ 60mg/L，維生素B2 0.2~0.3 mg/L；培養基功能液5 ～8mg/L。

4.根據權利要求4所述鐵皮石斛快速成苗的方法，其特征在于：所述步驟4）中生根培養基由以下組分組成：1/2 MS基本培養基+吲哚丁酸IBA0 .5～2 .0mg/L+PQQ 0.5 ～1.5umol/L +胺鮮酯0 .02～0 .1mg/L+香蕉肉汁5～15g/L+檸檬酸5～12g/L+維生素B2 0.2~0.3 mg/L+植物提取混合物12 ～18mg/L+培養基功能液5 ～8mg/L；所述植物提取液由桑葉提取物、菱角葉汁以及鞣質組成；所述桑葉提取物、菱角葉汁以及鞣質三者之間的重量份比依次分別為5：8：1；所述培養基功能液由蘆薈凝膠、皂甙以及棕櫚酸組成；所述蘆薈凝膠、皂甙以及棕櫚酸的重量份比例依次分別為6:4:1。