[發明專利]一種使報春石斛種子快速繁殖成苗的培養基及方法

有效

• 申請號: 201810871885.0
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN109122312B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發明（設計）人: 仇碩;趙健;唐鳳鸞;趙志國;夏科;周浩;蔣慶鴻
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區中國科學院廣西植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 楊立;周玉婷

1.一種使報春石斛種子快速繁殖成苗的培養基，其特征在于，由種子萌發和原球莖誘導培養基、原球莖增殖和叢生芽誘導培養基以及生根壯苗培養基組成，其中，

所述種子萌發和原球莖誘導培養基由MS基本培養基、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA和20g/L的蔗糖組成；

所述原球莖增殖和叢生芽誘導培養基由MS基本培養基、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、20g/L的蔗糖和100g/L的香蕉泥組成；

所述生根壯苗培養基由MS基本培養基、1.0-3.0mg/L的6-BA、0.5mg/L的KT、0.2mg/L的NAA、100g/L的香蕉泥、30g/L的蔗糖和1.0g/L的活性炭組成。

2.根據權利要求1所述的一種使報春石斛種子快速繁殖成苗的培養基，其特征在于，所述種子萌發和原球莖誘導培養基、所述原球莖增殖和叢生芽誘導培養基以及所述生根壯苗培養基的pH值均為5.8。

3.一種利用權利要求1或2所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1：無菌播種及原球莖誘導培養

將成熟未開裂的報春石斛蒴果消毒后，取出種子，均勻播種于種子萌發和原球莖誘導培養基中，先進行暗培養，待種子轉綠后再進行光培養，待種子萌發后，得到原球莖；

步驟2：原球莖增殖和叢生芽誘導培養

將步驟1得到的原球莖，均勻轉接到原球莖增殖和叢生芽誘導培養基中，進行光培養，待原球莖增殖后，誘導得到叢生芽；

步驟3：叢生芽生根壯苗培養

當步驟2得到的叢生芽長出2-3片葉子、高2-3cm時，均勻轉接到生根壯苗培養基中，進行光培養，得到生根試管苗；

步驟4：移栽馴化

于春季3-4月，將步驟3得到的生根試管苗，煉苗15-30d天后，洗凈根部，移栽到移栽基質中，再置于塑料大棚中，澆水、保濕至成苗、出圃，即得到報春石斛種苗。

4.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟1中，所述消毒的具體步驟為：先用洗潔精清洗報春石斛蒴果的表面，再用自來水沖洗至少30min，然后用75％v/v酒精浸泡1min，接著用無菌水沖洗1次，再用0.1％的升汞浸泡15-30min，然后用無菌水沖洗至少5次。

5.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟1中，所述暗培養的溫度為25±2℃，時間為20-30d。

6.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟2中，所述原球莖的接種量為每個培養瓶接種150-200個原球莖，所述培養瓶的容量為630mL，每個培養瓶中放有100mL原球莖增殖和叢生芽誘導培養基。

7.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟3中，所述叢生芽的接種量為每個培養瓶接種15-20個叢生芽，所述培養瓶的容量為630mL，每個培養瓶中放有100mL生根壯苗培養基。

8.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟1、步驟2和步驟3中，所述光培養的溫度均為25±2℃，光照強度均為1500-2000lux，光周期均為12h/d，光照時間分別為30-50d、45-60d和80-120d。

9.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟4中，所述煉苗的條件為：以散光為主，光照強度為3000-4000lux,溫度為15-25℃，濕度為70-80％。

10.根據權利要求3所述的一種所述培養基使報春石斛種子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步驟4中，所述移栽基質經甲基托布津粉劑600倍稀釋液消毒處理，所述移栽基質為樹皮、水苔、珍珠巖和蛭石按質量比為10:2:1:1組成的混合物或者樹皮、珍珠巖和蛭石按質量比為10:1:1組成的混合物；所述塑料大棚在夏季用70％遮陽網進行遮陰。