[發明專利]一種三葉青總酚類的提取及純化方法

在審

• 申請號: 201810871115.6
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN108853274A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發明（設計）人: 許文;范世明;徐惠龍;黃鳴清;陳瑾;吳水生
• 申請（專利權）人: 福建中醫藥大學
• 主分類號: A61K36/87
• 分類號: A61K36/87;A61P35/00;A61P39/06;A61P9/00;A61P29/00;A61P31/04;A61P31/10;A61P31/12;A61K127/00
• 代理公司: 福州市博深專利事務所(普通合伙) 35214
• 代理人: 林志崢

本發明屬于酚類提取及純化方法技術領域，具體為一種三葉青總酚類的提取及純化方法，包括如下步驟：步驟1、將干燥后的三葉青葉粉碎，得三葉青葉藥材粉末，加入乙醇，所述乙醇的加入量為三葉青葉藥材粉末重量的10?35倍，選擇回流提取、溫浸提取或超聲提取的任意一種提取方法，提取液在50?80℃的條件下抽濾；步驟2、將步驟1的提取液除去乙醇得到提取濃縮液，將提取濃縮液上樣于大孔吸附樹脂柱上，上樣后，先用除雜溶劑進行淋洗，所述除雜溶劑為pH＝3的酸水，再用乙醇溶液進行洗脫，收集含總酚類的洗脫液，洗脫液濃縮至干得純化的三葉青總酚類。本發明制備方法簡單，操作方便，得到了最佳的三葉青總酚類提取及純化方法。

技術領域

本發明屬于酚類提取及純化方法技術領域，具體為一種三葉青總酚類的提取及純化方法。

背景技術

三葉青屬葡萄科崖爬藤屬植物三葉崖爬藤(Tetrastigma hemsleyanum Diels etGilg)科植物，是我國使用較為悠久的一種藥用植物，金線吊葫蘆、絲線吊金鐘、三葉扁藤、石老鼠等均為三葉青現有別名；其性涼，味苦、辛，無毒。根據中國古代醫書記載，三葉青經常用來治療高熱驚厥、肺炎、肝炎、月經不調等疾病。

現代研究表明三葉青有抗腫瘤、抗炎、解熱、鎮痛、保肝、抗病毒等作用，是我國特有且經常使用的中草藥。在民間，三葉青全草入藥，由于葉的資源為可持續、再生資源，實驗研究發現，三葉青葉酚類成分含量也較高，經液質定性酚類成分包括酚類類和酚酸類化合物是三葉青葉中主要活性成分。并且經研究證實三葉青葉的藥理活性包括抗腫瘤、抗氧化、治療心血管疾病、抗炎、抗病毒、抗感染等。

近些年來有關三葉青研究涉及到了很多方面，但是對于三葉青葉中總酚類的提取及純化方法研究并沒有深入考察，做到最佳。并且目前多數研究對象都是三葉青塊根，對于三葉青葉研究較少，對于三葉青葉總酚類的提取、純化方法研究鮮有報道，并且通常是利用紫外分光光度法對總酚類含量進行測定來優化工藝，不能針對性的保證有效成分的提取率。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是：提供一種三葉青總酚類的提取及純化方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用的技術方案為：一種三葉青總酚類的提取及純化方法，包括如下步驟：

步驟1、將干燥后的三葉青葉粉碎，得三葉青葉藥材粉末，加入乙醇，所述乙醇的加入量為三葉青葉藥材粉末重量的10-35倍，選擇回流提取、溫浸提取或超聲提取的任意一種提取方法，提取液在50-80℃的條件下抽濾；

步驟2、將步驟1的提取液除去乙醇得到提取濃縮液，用大孔吸附樹脂進行濕法裝柱，將提取濃縮液上樣于大孔吸附樹脂柱上，上樣后，先用除雜溶劑以2-6BV/h的流速進行淋洗，所述除雜溶劑為pH＝2-6的酸水，用量為1-5BV，再用50％-90％的乙醇溶液以2-6BV/h的流速進行洗脫，收集含總酚類的洗脫液，洗脫液濃縮至干得純化的三葉青總酚類。

本發明的有益效果在于：本發明提供的三葉青總酚類的提取及純化方法，采用高效液相色譜法和紫外分光光度法相結合，對三葉青葉提取物中的酚類成分含量進行測定，高效液相色譜法具有高重現性和高靈敏度，使得實驗結果更加準確，并綜合分析其得膏率，基于單因素考察，結合正交實驗法得到最佳的三葉青總酚類提取及純化方法；所有抽濾時保持在50-80℃的條件下抽濾，在提取方法研究過程中發現，將一定體積的不同體積分數的乙醇加入三葉青葉粉末中時，當乙醇濃度低于50％時，三葉青粉末飄浮于乙醇液面上，不能立即浸潤。保持微沸提取一段時間后均沉于底部。當提取完成抽濾獲得上清液時，濃度低于50％乙醇很難過濾，并且提取效率不佳。此時乙醇濃度不夠，所提取出來的三葉青多糖及粘液質等成分較多，使得提取液較為粘稠，所有抽濾時盡量保持在50-80℃的條件下抽濾，減少濾液體積的損失。采用酸水作為除雜溶劑，三青葉中的總酚類不會跟隨酸水洗脫被洗脫，幾乎沒有泄露，雜質被洗脫下來，提高了三葉青總酚類的純化效果。

附圖說明