[發(fā)明專利]一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810871030.8
• 申請日: 2018-08-02
• 公開（公告）號: CN108849860A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王紅燕;馬良宏;顏貝;王燕蓉;裴秀英;周岳;裴承斌;田稼;徐焱焱;王紅紅
• 申請（專利權(quán)）人: 寧夏醫(yī)科大學(xué);寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 西安匯恩知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61244
• 代理人: 邢立立

本發(fā)明公開了一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑，該精液冷凍保護(hù)劑內(nèi)添加有400ug/ml的枸杞多糖，通過以下方法制備所得：稱取40mg枸杞多糖,1.5g葡萄糖，1.72g甘氨酸，1.72g枸櫞酸鈉，用52ml超純水溶解后，加入28ml的甘油，濾過，加入20ml的蛋黃，拌勻，即得100ml抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑。本發(fā)明的精液冷凍保護(hù)劑可增強(qiáng)凍后精子的前向運動百分率、復(fù)蘇率、線粒體膜電位正常百分率、頂體反應(yīng)正常百分率，降低氧化應(yīng)激性DNA損傷(核碎裂指數(shù)DFI)、凍后精子ROS和丙二醛降低從而提高了精液的抗氧化能力，改善了凍后精液的質(zhì)量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑。

背景技術(shù)

目前人類精液冷凍保存技術(shù)已經(jīng)相對成熟并在臨床得到廣泛應(yīng)用，成為輔助生殖技術(shù)(ART)領(lǐng)域中的重要技術(shù)。研究表明，精液冷凍過程中，冷凍刺激導(dǎo)致過量活性氧(ROS)的產(chǎn)生，從而使精子處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，導(dǎo)致冷凍復(fù)蘇后引起精子氧化應(yīng)激性DNA損傷、精子活力和精子受精等精子功能的損傷，所以冷凍可以明顯通過降低精子的抗氧化能力影響精子的功能，如何改進(jìn)精液保護(hù)劑，降低復(fù)蘇后精子DNA損傷，提高精子活力成為精液冷凍技術(shù)的發(fā)展趨勢。

因為精液冷凍技術(shù)不可避免的氧化應(yīng)激等體外干擾因素可能通過表觀遺傳修飾影響配子內(nèi)印記基因的表達(dá)，導(dǎo)致配子的表觀遺傳信息改變。目前眾多的試管嬰兒來自于凍精或凍胚后移植，隨著人們對生殖質(zhì)量尤其遺傳問題的日愈重視，評估精液冷凍技術(shù)的表觀遺傳安全性，改良冷凍保護(hù)劑，降低保護(hù)劑毒性提高其遺傳安全性，改善妊娠結(jié)局勢在必行。

研究已證實，精液冷凍保護(hù)劑加入超氧化物歧化酶(SOD)、維生素E等抗氧化劑，通過清除氧自由基，抵抗各種氧化因子對生物組織的氧化性破壞，減少冷凍對精液刺激產(chǎn)生的過量ROS，保護(hù)精子線粒體功能和精子生物膜結(jié)構(gòu)的完整性，從而改善冷凍復(fù)蘇后精子質(zhì)量。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑，可以提高精液的抗氧化效應(yīng)，降低冷凍刺激過程中的精子的氧化應(yīng)激反應(yīng)。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑，該精液冷凍保護(hù)劑內(nèi)添加有

400ug/ml的枸杞多糖，通過以下方法制備所得：

稱取40mg枸杞多糖,1.5g葡萄糖，1.72g甘氨酸，1.72g枸櫞酸鈉，用52ml超純水溶解后，加入28ml的甘油，濾過，加入20ml的蛋黃，拌勻，即得100ml抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑。

本發(fā)明具有以下有益效果：

本發(fā)明的精液冷凍保護(hù)劑可增強(qiáng)凍后精子的前向運動百分率、復(fù)蘇率、線粒體膜電位正常百分率、頂體反應(yīng)正常百分率，降低氧化應(yīng)激性DNA損傷(核碎裂指數(shù)DFI)、凍后精子ROS和丙二醛降低從而提高了精液的抗氧化能力，改善了凍后精液的質(zhì)量。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

本發(fā)明實施例的一種抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑以超純水為基液，枸櫞酸鈉、甘氨酸和葡萄糖為緩沖液，甘油和蛋黃作為滲透性和非滲透性保護(hù)劑成分，添加具有抗氧化和對生殖細(xì)胞具有保護(hù)性作用的枸杞多糖形成，通過以下方法制備所得：

稱取40mg枸杞多糖,1.5g葡萄糖，1.72g甘氨酸，1.72g枸櫞酸鈉，用52ml超純水溶解后，加入28ml的甘油，濾過，加入20ml的蛋黃，拌勻，即得100ml抗氧化應(yīng)激的精液冷凍保護(hù)劑。