[發明專利]一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株篩選方法和鑒定方法

在審

• 申請號: 201810866211.1
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN109306331A
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 陳士恩;車敏娜;馬愛愛;李明生;吳恒;熱孜萬古力．賽買提;烏拉木別克;劉斯汝
• 申請（專利權）人: 西北民族大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12R1/465
• 代理公司: 北京智客聯合知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11700
• 代理人: 李戍

1.一株產抗癌活性物質的放線菌菌株，其特征在于，所述放線菌為公牛鏈霉菌，命名為公牛鏈霉菌(Streptomyces tauricus)FGR-015，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏時間為2018年6月14日，保藏編號為CGMCC No.15942。

2.根據權利要求1所述的一株產抗癌活性物質的放線菌菌株的篩選方法，其特征在于，采用梯度稀釋法進行放線菌的篩選，具體操作步驟為：

1)稀釋液的制備：將青海牧民自產發酵風干牦牛肉產地的土壤樣品10g于無菌環境下迅速轉移至含有90mL無菌水、且預先放入無菌小玻璃珠的250mL錐形瓶中，充分振蕩后，進行梯度稀釋；

2)梯度稀釋方法為：用移液槍吸取上述10^-1稀釋液1mL移入裝有9mL無菌水試管中，充分混勻，再用移液槍轉移1mL稀釋液至下一個9mL試管中，依次類推，最后稀釋至濃度為10^-5的稀釋液；

3)選取濃度為10^-3、10^-4和10^-5的稀釋液，用移液槍分別吸取0.2mL三種濃度的稀釋液，涂布于備好的含抑菌劑的平板高氏1號瓊脂培養基上，28℃培養；平板高氏1號瓊脂培養基的組成為：可溶性淀粉20g，瓊脂18g，KNO₃ 0.1g，K₂HPO₄ 0.05g，MgSO₄·7H₂O 0.05g，NaCl0.05g，FeSO₄·7H₂O 0.001g，蒸餾水1000mL，加入數滴10％酚溶液，121℃滅菌20min。

3.根據權利要求1所述的一株產抗癌活性物質的放線菌菌株的鑒定方法，其特征在于，所述鑒定方法包括菌落形態學特征觀察、菌絲光學顯微鏡觀察、菌絲孢子掃描電鏡觀察、生理生化特征鑒定和分子學鑒定。