[發明專利]產生用于納米孔傳感器的雙層的方法

在審

• 申請號: 201810865708.1
• 申請日: 2013-02-15
• 公開（公告）號: CN108949944A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 蘭德爾·戴維斯;R·陳
• 申請（專利權）人: 吉尼亞科技公司
• 主分類號: C12Q1/6869
• 分類號: C12Q1/6869
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 牟靜芳;鄭霞

1.一種用于檢測靶分子的方法，其包括：

(a)提供在鄰近或靠近感測電極設置的膜中包含納米孔的芯片；

(b)引導核酸分子穿過所述納米孔，其中所述核酸分子與報道分子相關聯，其中所述核酸分子包含地址區域和探針區域，其中所述報道分子與所述核酸分子在所述探針區域相關聯，并且其中所述報道分子與靶分子偶聯；

(c)在引導所述核酸分子穿過所述納米孔的同時對所述地址區域進行測序，以確定所述地址區域的核酸序列；及

(d)在計算機處理器的輔助下，基于在(c)中確定的所述地址區域的核酸序列，鑒別所述靶分子。

2.如權利要求1所述的方法，其中通過報道分子與所述核酸分子的探針區域的結合，將(b)中的探針分子保持在所述孔中。

3.如權利要求2所述的方法，其中當所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率降低時，所述核酸分子的最多三個堿基得到鑒別。

4.如權利要求2所述的方法，其中當所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率降低時，所述核酸分子的最多五個堿基得到鑒別。

5.如權利要求2所述的方法，其中在所述報道分子與所述納米孔相互作用時，所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率降低。

6.如權利要求1所述的方法，其中在(b)中，所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率停止或停頓。

7.如權利要求1所述的方法，其還包括，在(d)之前，確定所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率是否已經降低。

8.如權利要求1所述的方法，其中，在(d)中，若確定所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率已經降低，則所述靶分子得到鑒別。

9.如權利要求1所述的方法，其中，在(d)中，基于(i)所述地址區域的核酸序列和關聯與(ii)所述核酸分子通過所述納米孔的前進速率之間的相關性，鑒別所述靶分子。

10.如權利要求1所述的方法，其中所述納米孔為可單獨尋址的。

11.如權利要求1所述的方法，其中所述核酸分子是單鏈的。

12.如權利要求1所述的方法，其還包括將所述核酸分子捕獲于所述納米孔中。

13.如權利要求12所述的方法，其中在形成于所述核酸分子的一個或多個端部的大體積結構的輔助下，所述核酸分子被捕獲于所述納米孔中。

14.如權利要求12所述的方法，其中在附著于所述核酸分子的一個或多個端部的大體積結構的輔助下，所述核酸分子被捕獲于所述納米孔中。

15.如權利要求1所述的方法，其還包括逆轉所述核酸分子穿過所述納米孔的流動方向。

16.如權利要求15所述的方法，其還包括當逆轉所述核酸分子的流動方向時，對所述地址區域的至少一部分進行重新測序。

17.如權利要求1所述的方法，其中所述報道分子在所述報道分子的端部包含抗體或適體，并且其中所述抗體或適體與所述靶分子相關聯。

18.如權利要求1所述的方法，其中地址區域和探針區域具有已知的核酸序列。

19.如權利要求1所述的方法，其中所述報道分子包含與所述探針區域的核酸序列互補的核酸序列。

20.如權利要求1所述的方法，其中在被引導穿過所述納米孔之前，所述核酸分子與所述報道分子相關聯。

21.如權利要求1所述的方法，其中，在(b)之前，所述核酸分子穿過所述納米孔，并且其中，在(b)中，所述報道分子與已穿過所述納米孔的所述核酸分子相關聯。