[發明專利]一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株發酵方法及其次級代謝產物的提取方法

在審

• 申請號: 201810863559.5
• 申請日: 2018-08-01
• 公開（公告）號: CN109082390A
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發明（設計）人: 陳士恩;車敏娜;馬愛愛;李明生;吳恒;熱孜萬古力·賽買提;烏拉木別克;劉斯汝
• 申請（專利權）人: 西北民族大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/02;C07K7/06;A61P35/00;C12R1/465
• 代理公司: 北京智客聯合知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11700
• 代理人: 李戍

本發明公開了一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株發酵方法及其次級代謝產物的提取方法，所述放線菌為公牛鏈霉菌(Streptomyces tauricus)，命名為公牛鏈霉菌FGR?015，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏時間為2018年6月14日，保藏編號為CGMCC No 15942。與現有技術相比，本發明的有益效果是：公牛鏈霉菌FGR?015的次級代謝產物不僅僅是一種色素，還是有較強活性地抑菌劑和抗癌物質，且經過本發明發酵、提取方法的優化后，產量可達1.124g/L，產量是以前的5.5倍。

技術領域

本發明涉及微生物生產技術領域，具體涉及一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株發酵方法及其次級 代謝產物的提取方法。

背景技術

惡性腫瘤是全世界一個主要的致死病種，據世界衛生組織報道，2012年全世界因惡性腫瘤死亡的人次 達820萬，預計惡性腫瘤病例將持續迅猛增長，將逐年遞增至2025年1900萬人，2035年達2400萬人。 腫瘤嚴重威脅人類生命健康，而現有大多化學藥物在治療疾病的同時，不僅僅殺傷腫瘤細胞，正常細胞也 收到嚴重的傷害，從而使患者產生了嚴重的不良反應。因此，尋求一類高效、低毒的抗腫瘤藥物迫在眉睫， 將有助于提高用藥安全性和有效性。

放線菌是一類次級代謝產物功能豐富的菌屬，其次級代謝產物不僅可作為色素、抗生素等，放線菌還 是一類具有開發利用潛質的抗癌藥物，在生命科學領域、食品行業、飼料添加劑、醫學科學及化工工業等 行業具有潛在的應用價值。但是產量受發酵、提取等各個不確定因素的制約，而無法大量生產。

發明內容

本發明的目的就是針對上述現有技術中的缺陷，提供了一株產抗癌活性物質的放線菌菌株發酵方法及 其次級代謝產物的提取方法。

為了實現上述目的，本發明提供的技術方案為：一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株，所述放線菌 為公牛鏈霉菌，命名為公牛鏈霉菌(Streptomyces tauricus)FGR-015，保藏單位為中國微生物菌種保藏 管理委員會普通微生物中心(地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編 100101)，保藏時間為2018年6月14日，保藏編號為CGMCC No.15942。

本發明的第二個目的是提供了上述一株產抗癌活性物質的公牛鏈霉菌菌株的發酵方法，包括有種子發 酵和擴大培養發酵：

所述種子培養基組成為：馬鈴薯淀粉15g，葡萄糖5g，大豆粉10g，氯化鈉1g，酵母提取物5g，碳 酸鈣5g，蒸餾水1000mL；pH值調節為7.1；種子的發酵方法為：接種量為5％～25％，裝瓶量為20％～ 70％，搖床轉速為120～170r/min，搖床溫度為22～32℃，發酵時間為4～5d；

所述擴大培養基組成為：可溶性淀粉20g，KNO₃ 0.1g，K₂HPO₄ 0.05g，MgSO₄·7H₂O0.05g，NaCl 0.05 g，FeSO₄·7H₂O 0.001g，蒸餾水1000mL，pH值調節為7.1；擴大發酵方法為：種子接種量為12.61％， 裝瓶量為48.65％，搖床轉速為150r/min，搖床溫度為28℃，發酵時間為7.5d。

本發明的第三個目的是提供了公牛鏈霉菌(Streptomyces tauricus)FGR-015菌株次級代謝產物的提 取方法，包括以下步驟：

1)將以上述發酵方法制備得到的擴大發酵產物，以離心轉速為10000r/min，4℃離心20min，棄沉淀 物；