[發明專利]六神曲指紋圖譜的檢測方法

在審

• 申請號: 201810853447.1
• 申請日: 2018-07-27
• 公開（公告）號: CN108982696A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 鄭艷萍;蔡寶昌;湯劍峰;金俊杰;秦昆明;陳海超;李國維;孫戡平;彭思穎
• 申請（專利權）人: 南京海昌中藥集團有限公司;南京海源中藥飲片有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

1.一種六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、六神曲供試品溶液的制備：

取不同批次的六神曲，打粉，過篩，分別精密稱取六神曲粉末樣品，置錐形瓶中，加有機溶劑，提取，過濾，取濾渣加甲醇，回流提取，過濾，濃縮濾液，加甲醇定容，過0.22μm微孔濾膜，得供試品溶液；

步驟2、混合對照品溶液的制備：

精密稱定隱綠原酸、沒食子酸、異綠原酸A、和厚樸酚對照品，置于容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，制成混合對照品溶液；

步驟3、分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖；

步驟4，將步驟3中獲得的六神曲供試品溶液的指紋圖譜導出，并導入中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統2004A；選擇不同批次六神曲的色譜圖中均存在的色譜峰作為共有峰；用平均值計算法生成六神曲的對照指紋圖譜，計算各共有峰的相對保留時間和相對峰面積；并根據混合對照品溶液色譜圖的保留時間標注對照指紋圖譜中峰的化學成分。

2.根據權利要求1所述的六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟1六神曲供試品溶液制備方法為：取12批次的六神曲，打粉，過65目篩，精密稱取六神曲粉末樣品7.5g置100mL錐形瓶中，加石油醚30mL，超聲處理30min，過濾，濾渣加甲醇40mL，回流提取1h，過濾，濾液濃縮至2～3mL，加甲醇定容成5mL，過0.22μm微孔濾膜，得供試品溶液。

3.根據權利要求1所述的六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟2混合對照品溶液的制備：取精密稱定隱綠原酸、沒食子酸、異綠原酸A、和厚樸酚對照品，置于容量瓶中，用乙醇定容至刻度，搖勻，制成0.1094mg/mL的沒食子酸、0.1092mg/mL隱綠原酸、0.1072mg/mL的異綠原酸A、0.1112mg/mL的和厚樸酚組成的混合對照品溶液。

4.根據權利要求1至3任一項所述的六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，步驟3中，液相色譜條件為：色譜柱：YMC-Pack ODS-A，流動相：乙腈和0.05％磷酸水，梯度洗脫，二極管陣列檢測器，檢測波長：280nm，柱溫30℃，流速1mL/min，進樣體積：10μL。

5.根據權利要求4所述的六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，梯度洗脫程序如下表：

6.根據權利要求1所述的六神曲指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，可可檢測30種以上的共有色譜峰。