[發明專利]一種用于致病性弧菌檢測的核酸組合及其應用

有效

• 申請號: 201810852735.5
• 申請日: 2018-07-27
• 公開（公告）號: CN108841980B
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 韓嘉鈺;陳浩東;吳春云;黃忱;彭麗
• 申請（專利權）人: 四川華漢三創生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/63
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 齊云

1.一種用于致病性弧菌檢測的核酸組合，其特征在于，其包括如下引物對：

用于檢測霍亂弧菌toxR基因的第一引物對，其包括： SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物；

用于檢測霍亂弧菌ctxAB基因的第二引物對，其包括：SEQ ID NO.3所示的上游引物和SEQ ID NO.4所示的下游引物；

用于檢測副溶血性弧菌toxR基因的第三引物對，其包括：包括SEQ ID NO.5所示的上游引物和SEQ ID NO.6所示的下游引物；

用于檢測副溶血性弧菌tlh基因的第四引物對，其包括：SEQ ID NO.7所示的上游引物和SEQ ID NO.8所示的下游引物；

用于檢測副溶血性弧菌tdh基因的第五引物對，其包括：SEQ ID NO.9所示的上游引物和SEQ ID NO.10所示的下游引物；

用于檢測副溶血性弧菌trh基因的第六引物對，其包括：SEQ ID NO.11所示的上游引物和SEQ ID NO.12所示的下游引物；

用于檢測創傷弧菌vvhA基因的第七引物對，其包括：SEQ ID NO.13所示的上游引物和SEQ ID NO.14所示的下游引物；

用于檢測擬態弧菌toxR基因的第八引物對，其包括：SEQ ID NO.15所示的上游引物和SEQ ID NO.16所示的下游引物；

用于檢測河流弧菌toxR基因的第九引物對，其包括：SEQ ID NO.17所示的上游引物和SEQ ID NO.18所示的下游引物；

用于檢測溶藻弧菌coIH基因的第十引物對，其包括：SEQ ID NO.19所示的上游引物和SEQ ID NO.20所示的下游引物；引物對中的上游引物的5’端或下游引物的5’端標記有生物素；

所述核酸組合還包括堿基序列如SEQ ID NO.23-32所示的探針；所述探針固定于膜芯片上。

2.根據權利要求1所述的核酸組合，其特征在于，所述探針的5’端標記有用于固定至膜芯片上的第一連接基團。

3.根據權利要求2所述的核酸組合，其特征在于，所述第一連接基團為氨基。

4.根據權利要求1-3任一項所述的核酸組合，其特征在于，所述核酸組合還包括陽性對照探針，所述陽性對照探針的堿基序列如SEQ ID NO.34所示。

5.根據權利要求4所述的核酸組合，其特征在于，所述核酸組合還包括用于與陽性探針雜交結合的陽性寡核苷酸單鏈DNA分子，陽性寡核苷酸單鏈DNA分子的堿基序列如SEQ IDNO.36所示。

6.根據權利要求4所述的核酸組合，其特征在于，所述陽性對照探針的5’端標記有用于固定至膜芯片上的第二連接基團。

7.根據權利要求6所述的核酸組合，其特征在于，所述第二連接基團為氨基。

8.根據權利要求1-3任一項所述的核酸組合，其特征在于，所述核酸組合還包括陰性對照探針，所述陰性對照探針的堿基序列如SEQ ID NO.35所示。

9.權利要求1-8中任一項所述的核酸組合在制備致病弧菌檢測試劑盒中的應用。