[發明專利]用于檢測rs730012的引物探針組及其應用在審
| 申請號: | 201810848809.8 | 申請日: | 2018-07-28 |
| 公開(公告)號: | CN109022430A | 公開(公告)日: | 2018-12-18 |
| 發明(設計)人: | 叢茜;趙海文;劉婷婷;李朋;孫國龍;王海建;徐鳳玲;夏明泉 | 申請(專利權)人: | 山東德諾生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/11 | 分類號: | C12N15/11;C12Q1/6883;C12Q1/6858 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 261000 山東省濰坊市*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 單鏈DNA分子 引物探針 引物F 引物R 探針 檢測 應用 熒光淬滅基團 待測樣本 核苷酸序 熒光基團 核苷酸 基因型 鎖核酸 可用 位點 | ||
1.引物探針組,由引物F、引物R和探針P組成;
引物F為如下(a1)或(a2):
(a1)序列表的序列1所示的單鏈DNA分子;
(a2)將序列1經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列1具有相同功能的DNA分子;
引物R為如下(b1)或(b2):
(b1)序列表的序列2所示的單鏈DNA分子;
(b2)將序列2經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列2具有相同功能的DNA分子;
探針P為一個末端具有熒光基團且另一個末端具有熒光淬滅基團的單鏈DNA分子,且DNA分子中的部分核苷酸為鎖核酸,DNA分子的核苷酸序列為如下(c1)或(c2):
(c1)序列表的序列3所示;
(c2)將序列3經過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加。
2.如權利要求1所述的引物探針組,其特征在于:所述探針P的核苷酸序列如序列表的序列3所示,且第1-3位核苷酸和第22-24位核苷酸均為鎖核酸。
3.權利要求1或2所述引物探針組在制備用于檢測rs730012的試劑盒中的應用。
4.一種用于檢測rs730012的試劑盒,包括權利要求1或2所述引物探針組。
5.組件甲和組件乙在制備用于檢測rs730012的試劑盒中的應用;組件甲為權利要求1或2所述引物探針組;組件乙為試劑或試劑組合,組件乙的功能為用血液樣本制備用于熒光定量PCR的模板樣本。
6.一種用于檢測rs730012的試劑盒,包括組件甲和組件乙;組件甲為權利要求1或2所述引物探針組;組件乙為試劑或試劑組合,組件乙的功能為用血液樣本制備用于熒光定量PCR的模板樣本。
7.一種用血液樣本制備用于熒光定量PCR的模板樣本的試劑盒,包括裂解液;所述裂解液為所述裂解液為1.5-2 g/100ml的NaCl水溶液。
8.一種用血液樣本制備用于熒光定量PCR的模板樣本的方法,包括如下步驟:
(1)取抗凝血,加入權利要求7中所述的裂解液,顛倒混勻,離心棄上清;
(2)完成步驟(1)后,加入保存液,先60-70℃水浴,再80-90℃水浴,然后離心,使用時取上清,即為模板樣本。
9.特異探針在進行熒光定量PCR檢測中的應用;所述特異探針為具有鎖核酸修飾的分子信標。
10.一種用于熒光定量PCR檢測的特異探針,為具有鎖核酸修飾的分子信標。
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