[發(fā)明專利]一株產(chǎn)灰黃霉素的菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810832779.1
• 申請日: 2018-07-26
• 公開（公告）號: CN108823110B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳松剛;黃建忠;黃欽耿;翁雪清;施碧紅;梁玲;蔡玉鳳;吳宇峰
• 申請（專利權(quán)）人: 福州工微生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/04;A01N63/36;A01P3/00;C12R1/80
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;張立娜

本發(fā)明公開了一株產(chǎn)灰黃霉素的菌株及其應(yīng)用。本發(fā)明提供了灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816，其在中國典型培養(yǎng)物保藏中心的保藏編號為CCTCC NO：M 2018187。利用本發(fā)明所提供的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816生產(chǎn)灰黃霉素，采用不用乳糖和玉米漿的原料路線和流加補(bǔ)氯發(fā)酵新工藝，可大幅度提高灰黃霉素的發(fā)酵效價(jià)，降低生產(chǎn)成本，為開發(fā)作為抗真菌生物農(nóng)藥——松剛霉素提供可靠的原料來源。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一株產(chǎn)灰黃霉素的菌株及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

灰黃霉素作為一類醫(yī)農(nóng)兩用的抗生素，最早為國外廠商開發(fā)的第一代抗皮膚真菌病藥物，在20世紀(jì)60年代上市，曾被國際藥學(xué)界譽(yù)為是對付真菌病的一大里程碑重大藥物。隨著生物技術(shù)及生物信息學(xué)的不斷進(jìn)步，灰黃霉素的應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大，其中最為讓人矚目方面在抗癌藥和農(nóng)業(yè)的應(yīng)用開發(fā)方面，其為灰黃霉素的市場拓展開辟了新途徑。經(jīng)過幾十年的長足發(fā)展，我國現(xiàn)已成為灰黃霉素原料藥的唯一生產(chǎn)國，總產(chǎn)能已擴(kuò)大至1000噸左右。

灰黃霉素農(nóng)用化使其作為生物農(nóng)藥成為可能，利用生物藕合技術(shù)，對灰黃霉素基團(tuán)進(jìn)行藕合修飾，使其具備更好的抗植物真菌病原的能力和水溶性，研制出新型抗真菌生物農(nóng)藥——松剛霉素，為進(jìn)一步開拓灰黃霉素市場提供了廣闊的空間。

目前國內(nèi)采用液體深層發(fā)酵模式生產(chǎn)的灰黃霉素，其工業(yè)化大生產(chǎn)的發(fā)酵水平多年來都維持在25000μg/mL左右，糖素的轉(zhuǎn)化率較低，而且在發(fā)酵周期超過240h，發(fā)酵過程中存在一段明顯的停滯期，發(fā)酵效率來說還是偏低，致使發(fā)酵成本處于高位，農(nóng)業(yè)推廣應(yīng)用受到限制。如何進(jìn)一步獲得高產(chǎn)灰黃霉素的菌株及開發(fā)高效的灰黃霉素發(fā)酵工藝，對于灰黃霉素的應(yīng)用及以灰黃霉素為主效成分的生物農(nóng)藥——松剛霉素的開發(fā)具有重大意義。

發(fā)明內(nèi)容

為了有效解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一株高產(chǎn)灰黃霉素的菌株。

第一方面，本發(fā)明要求保護(hù)一株灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816。

本發(fā)明所提供的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816，其在中國典型培養(yǎng)物保藏中心的保藏編號為CCTCC NO：M 2018187。

該菌株為自行從土壤中分離獲得的產(chǎn)灰黃霉素的出發(fā)菌株F3215(CCTCC NO：M2018188)通過紫外線加氯化鋰誘變獲得的優(yōu)良變株。該優(yōu)良菌株能夠高效積累灰黃霉素，而且發(fā)酵周期較現(xiàn)有發(fā)酵菌種明顯縮短，發(fā)酵原料來源廣泛，而且無氯灰黃霉素組分含量少。

第二方面，本發(fā)明要求保護(hù)一種菌劑。

本發(fā)明所提供的菌劑的活性成分為前文所述的灰黃青霉(Penicilliumgriseofulvum)FH1816。

第三方面，本發(fā)明要求保護(hù)前文所述的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816或所述菌劑在生產(chǎn)灰黃霉素中的應(yīng)用。

第四方面，本發(fā)明要求保護(hù)前文所述的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816或所述菌劑在制備松剛霉素中的應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)證明，利用本發(fā)明所提供的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816生產(chǎn)灰黃霉素，采用不用乳糖和玉米漿的原料路線和流加補(bǔ)氯發(fā)酵新工藝，可大幅度提高灰黃霉素的發(fā)酵效價(jià)，降低生產(chǎn)成本，為開發(fā)作為抗真菌生物農(nóng)藥——松剛霉素提供可靠的原料來源。經(jīng)發(fā)酵罐培養(yǎng)，本發(fā)明所提供的灰黃青霉(Penicillium griseofulvum)FH1816的生物量，菌絲體濕重達(dá)到29.5％，較原始菌株F3215的生物量提高120％；灰黃霉素效價(jià)達(dá)到30751μg/mL，較菌株F3215的灰黃霉素效價(jià)提高55倍；脫氯灰黃霉素占灰黃霉素比例為0.17％，較菌株F3215的脫氯灰黃霉素含量低33.5％。