[發明專利]烷醇酰胺及酰胺胺的微生物生產及其用途

在審

• 申請號: 201810830455.4
• 申請日: 2013-03-12
• 公開（公告）號: CN108949660A
• 公開（公告）日: 2018-12-07
• 發明（設計）人: 賈森·J·魯特斯;斯蒂芬·德爾卡戴雷
• 申請（專利權）人: REG生命科學有限責任公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P13/02;C12R1/19
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 張小勇

1.重組微生物體，其包含外源核酸序列，所述外源核酸序列編碼棕櫚酰腐胺合酶(PPS)，所述PPS具有與SEQ ID NO:1的氨基酸序列具有至少90％的序列同一性的氨基酸序列，其中所述PPS催化伯胺和酰基硫酯轉化為脂肪酰胺的多肽的，其中所述微生物體進一步表達外源硫酯酶(EC 3.12.14或EC 3.1.1.5)并且在碳源存在下進行培養。

2.權利要求1的重組微生物體，其中所述PPS多肽具有包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。

3.權利要求1的重組微生物體，其中所述PPS多肽由包含SEQ ID NO:2的外源核酸序列編碼。

4.權利要求1的重組微生物體，其中所述碳源是碳水化合物。

5.權利要求1的重組微生物體，其中所述伯胺選自：3-二甲氨基-1-丙胺、±-1-氨基-2-丙醇、2-甲氧基乙胺、3-氨基-1-丙醇、2-氨基-1,3-丙二醇、3-甲氧基丙胺、N-(2-羥乙基)乙二胺、丁胺、和1,4-二氨基丁烷、或其組合。

6.權利要求5的重組微生物體，其中所述酰基硫酯為脂肪酰基-ACP或脂肪酰基-CoA。

7.權利要求6的重組微生物體，其中所述脂肪酰基-ACP或脂肪酰基-CoA由所述微生物體產生。

8.權利要求1的重組微生物體，其中所述重組微生物體包含編碼脂肪酸生物合成多肽及酰基-CoA合成多肽(EC 2.3.1.86)中的一種或多種的外源核酸序列。

9.權利要求8的重組微生物體，其中所述微生物體包含編碼硫酯酶多肽和酰基-CoA合酶多肽的外源核酸序列。

10.權利要求8的重組微生物體，其中所述編碼硫酯酶多肽的外源核酸序列包含‘tesA的核酸序列。

11.權利要求1的重組微生物體，其中所述微生物體為細菌、藍細菌、藻類或真菌。

12.權利要求11的重組微生物體，其中所述微生物體為真菌。

13.權利要求12的微生物體，其中所述真菌為酵母或絲狀真菌。

14.權利要求1的重組微生物體，其中所述微生物為釀酒酵母、解脂假絲酵母、大腸埃希氏菌、節桿菌、紅酵母、不動桿菌、布朗葡萄藻、弗尼斯弧菌、藤黃微球菌、嗜麥芽寡養單胞菌、枯草芽孢桿菌，地衣芽孢桿菌、惡臭假單胞菌、熒光假單胞菌、天藍色鏈霉菌、聚球藻屬物種PCC7002、細長嗜熱藍細菌BP-1、桑椹型無綠藻、克魯格尼原藻、大型無綠藻、中型無綠藻或原殼小球藻細胞。

15.權利要求14的重組微生物體，其中所述微生物體為節桿菌AK 19、不動桿菌屬物種M-1株、大腸桿菌B、大腸桿菌C、大腸桿菌K或大腸桿菌W細胞。

16.權利要求5的重組微生物體，其中所述脂肪酰胺為脂肪烷醇酰胺或脂肪酰胺胺。

17.權利要求1的重組微生物體，其中所述微生物體表達絲氨酸脫羧酶多肽。

18.用于產生脂肪酰胺的方法，其包括：

(a)提供根據權利要求1的重組微生物體；并且

(b)將所述重組微生物體在適合于編碼催化伯胺和酰基硫酯轉化為脂肪酰胺的多肽的核酸序列的表達的條件下在至少一種多肽底物存在下進行培養。

19.權利要求18的方法，其進一步包括從培養基中分離脂肪酰胺。