[發(fā)明專利]一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液及其制備方法

在審

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• 申請日: 2018-07-25
• 公開（公告）號: CN108918227A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發(fā)明（設計）人: 晉玉寬
• 申請（專利權）人: 北京艾普希隆生物科技有限公司;艾普希隆(北京)科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 北京七夏專利代理事務所(普通合伙) 11632
• 代理人: 王曉豐

本發(fā)明涉及電鏡制樣固定液制備技術領域，具體的講涉及一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液，包括以下成分組成：1.0?3.0g多聚甲醛粉末；20.0?30.0ml蒸餾水；1.0?5.0ml1N氫氧化鈉；3.0?6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸緩沖液；22.0?26.0mg無水氯化鈣；其制備方法包括以下幾個步驟：步驟一，取1.0?3.0g多聚甲醛粉末溶于20.0?30.0ml蒸餾水中，升溫至65℃以下并不停攪拌；步驟二，在攪拌的同時加入1.0?3.0ml 1N氫氧化鈉，溶液透明后，冷卻冷卻后加入5％戊二醛3.0?6.0ml；步驟三，在混合溶液中加入二甲砷酸緩沖液或磷酸緩沖液，使體積達到50ml；步驟四，最后加入22.0?26.2ml無水氯化鈣，調節(jié)混合液pH為6.8?7.5即得產品固定液。

技術領域

本發(fā)明涉及電鏡制樣固定液制備技術領域，具體的講涉及一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液及其制備方法。

背景技術

隨著精準醫(yī)學的發(fā)展，觀察和了解單一個細胞生理和病理狀態(tài)下各種細胞器的超微形態(tài)結構，對基礎醫(yī)學研究和臨床病理診斷具有重要意義。目前對動物細胞的結構觀察中，光學顯微鏡和電子顯微鏡是必不可少的工具，光鏡觀察顯示的結構圖像，受限于其放大倍數(shù)，結構信息十分有限；透射電鏡可觀察細胞超微結構(隋淑光.用電鏡半薄切片技術制備光鏡連續(xù)觀察樣品的實驗[J].生物學教學,2011,36(7):58.)。故而，透射電子顯微鏡是研究生物超微結構的重要工具。對于生物樣品而言，專用固定液的制備對于生物組織樣本電鏡制樣至關重要，常用的固定液對微管的保存不好，所以亟待制備一種對微管有良好的保存作用的專用固定液。

發(fā)明內容

因此本發(fā)明提出一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液及其制備方法，用來解決常用的固定液對微管的保存不好的問題。

本發(fā)明的技術方案是這樣實現(xiàn)的：一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液，包括以下成分組成：1.0-3.0g多聚甲醛粉末；20.0-30.0ml蒸餾水；1.0-5.0ml 1N氫氧化鈉；3.0-6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸緩沖液；22.0-26.0mg無水氯化鈣。

進一步地，一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液，包括以下成分組成：2.2-3.0g多聚甲醛粉末；22.2-26.8ml蒸餾水；1.0-3.8ml 1N氫氧化鈉；3.0-6.0ml 5％戊二醛；二甲砷酸緩沖液；23.2-25.6mg無水氯化鈣。

進一步地，所述二甲砷酸緩沖液為0.2M，pH為7.2-7.6。

進一步地，所述二甲砷酸緩沖液由二甲砷酸鈉和鹽酸混合制得。

一種生物組織樣本電鏡制樣專用固定液的制備方法，包括以下幾個步驟：

步驟一，取1.0-3.0g多聚甲醛粉末溶于20.0-30.0ml蒸餾水中，升溫至65℃以下并不停攪拌；

步驟二，在攪拌的同時加入1.0-3.0ml 1N氫氧化鈉，溶液透明后，冷卻冷卻后加入5％戊二醛3.2-6.6ml；

步驟三，在混合溶液中加入二甲砷酸緩沖液，使體積達到50ml；

步驟四，最后加入22.0-26.2mg無水氯化鈣，調節(jié)混合液pH為6.8-7.5即得產品固定液。

進一步地，所述步驟三中二甲砷酸緩沖液的制備方法為：準備二甲砷酸鈉4.0-5.2g，加入蒸餾水至100ml；0.2N 1-20ml鹽酸，將二甲砷酸鈉溶液與0.2N 1-20ml鹽酸混合稀釋成200ml，得到不同pH的二甲砷酸緩沖液。

通過上述公開內容，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明采用二甲砷酸緩沖液制備的固定液比較穩(wěn)定，不易生長細菌，可長期保存，與低濃度的鈣質不發(fā)生沉淀反應。

具體實施方式