[發(fā)明專利]一種防止羊肚菌菌種退化的保藏培養(yǎng)基及保藏方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810820479.1 | 申請日： | 2018-07-24 |
| 公開（公告）號： | CN108913608A | 公開（公告）日： | 2018-11-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 徐巖巖;李潔;顧翰琦;彭艷芳;徐兆翮 | 申請（專利權(quán)）人： | 河北民族師范學(xué)院 |
| 主分類號： | C12N1/14 | 分類號： | C12N1/14;C12N1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 西安銘澤知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 俞曉明 |
| 地址： | 067000 河北*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 保藏 羊肚菌菌種 培養(yǎng)基 蒸餾水 硫酸銨 退化 超低溫保藏 磷酸二氫鉀 農(nóng)業(yè)微生物 經(jīng)濟(jì)成本 菌絲生長 菌種活化 時間成本 蔗糖 硫酸鎂 菌種 瓊脂 制種 配方 | ||
1.一種防止羊肚菌菌種退化的保藏培養(yǎng)基，其特征在于，1L所述保藏培養(yǎng)基的配方如下：蔗糖12g、硫酸銨6.0～6.2g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5～0.6g、瓊脂18～20g、蒸餾水1000mL，自然pH。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防止羊肚菌菌種退化的保藏培養(yǎng)基，其特征在于，1L所述保藏培養(yǎng)基的配方如下：蔗糖12g、硫酸銨6.2g、磷酸二氫鉀1g、硫酸鎂0.5g、瓊脂18g、蒸餾水1000mL，自然pH。
3.一種利用權(quán)利要求1所述的保藏培養(yǎng)基防止羊肚菌菌種退化的保藏方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)按照以下方法培養(yǎng)得到菌塊：
將待保藏的菌絲轉(zhuǎn)接于裝有權(quán)利要求1保藏培養(yǎng)基的試管斜面中，待菌絲長滿斜面后，得到菌塊；
(2)將菌塊進(jìn)行保藏，保藏方法為石蠟油保藏法、超低溫保藏法或者生理鹽水保藏法；
其中，超低溫保藏法如下：將配制好的體積分?jǐn)?shù)30％無菌甘油溶液作為保護(hù)液，加入凍存管中，向凍存管加入含有菌絲的菌塊，并使無菌甘油溶液完全浸沒菌塊，放置于-80℃進(jìn)行保藏；在-80℃保藏一天后，取凍存管進(jìn)行檢驗，選擇存活的菌種繼續(xù)-80℃長期保藏。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保藏方法，其特征在于，體積分?jǐn)?shù)30％無菌甘油按照以下方式制備：量取30mL甘油加入蒸餾水，定容至100mL，121℃高壓滅菌30min。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保藏方法，其特征在于，石蠟油保藏法如下：向菌絲長滿斜面的試管中注入滅菌的液體石蠟，使其覆蓋整個斜面，然后直立放于4～6℃中進(jìn)行保藏。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的保藏方法，其特征在于，生理鹽水保藏法如下：以權(quán)利要求1中不添加瓊脂的保藏培養(yǎng)基作為菌絲體的液體保藏培養(yǎng)基；取氯化鈉0.7～0.9克，溶入100毫升蒸餾水中，121℃高壓滅菌30min后得到無菌生理鹽水，備用；將待保藏的菌種接入液體保藏培養(yǎng)基中室溫220r/min振蕩培養(yǎng)5～7天；然后將培養(yǎng)的菌液注入滅菌后裝有生理鹽水的凍存管中，用石蠟涂封凍存管蓋，4℃保藏。
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