[發明專利]檢測14-3-3 eta蛋白的非均相化學發光免疫檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 201810812808.8
• 申請日: 2018-07-23
• 公開（公告）號: CN110579597A
• 公開（公告）日: 2019-12-17
• 發明（設計）人: 饒星;廖智星;劉宇卉;李臨;其他發明人請求不公開姓名
• 申請（專利權）人: 科美診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/532;G01N33/558
• 代理公司: 11372 北京聿宏知識產權代理有限公司
• 代理人: 吳大建;陳偉

1.一種用于檢測14-3-3eta蛋白的非均相化學發光免疫檢測試劑套裝，其包括：

組分a，其包含固相載體以及與之直接結合或間接結合的第一抗體或其結合片段，所述第一抗體或其結合片段能夠與14-3-3eta蛋白的第一表位特異性結合；

組分b，其包含能夠與底物反應或能夠催化底物生成可檢測信號第一標記物以及與之直接結合或間接結合的第二抗體或其結合片段，所述第二抗體或其結合片段能夠與14-3-3eta蛋白的第二表位特異性結合，且所述第二表位和所述第一表位不相重疊；

組分d，其包含能夠與底物反應或能夠催化底物生成可檢測信號的第二標記物以及與之直接結合或間接結合的第三抗體或其結合片段，所述第三抗體或其結合片段能夠與14-3-3eta蛋白的第二表位特異性結合，且所述第二表位和所述第一表位不相重疊。

2.根據權利要求1所述的試劑套裝，其特征在于，直接結合或間接結合第二標記物的第三抗體與直接結合或間接結合第一標記物的第二抗體為結合14-3-3eta蛋白的相同表位的同株抗體。

3.根據權利要求1所述的試劑套裝，其特征在于，所述的第一抗體、第二抗體、第三抗體分別獨立地選自單克隆抗體和/或多克隆抗體，優選單克隆抗體。

4.根據權利要求1-3中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述試劑套裝還包括作為校準品的14-3-3eta蛋白純品，所述校準品被校準品稀釋液按照比例梯度稀釋成不同濃度的工作校準品溶液。

5.根據權利要求1-4中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述第一抗體或其結合片段與特異性結合配對成員中的一員結合，而所述固相載體與特異性結合配對成員中的另一員結合；優選所述第一抗體或其結合片段與生物素結合，而所述固相載體與鏈霉親和素結合。

6.根據權利要求1-4中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述第二抗體或其結合片段與特異性結合配對成員中的一員結合，而所述第一標記物與特異性結合配對成員中的另一員結合；優選所述第二抗體或其結合片段與生物素結合，而所述第一標記物與鏈霉親和素結合。

7.根據權利要求1-4中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述第三抗體或其結合片段與特異性結合配對成員中的一員結合，而所述第二標記物與特異性結合配對成員中的另一員結合；優選所述第三抗體或其結合片段與生物素結合，而所述第二標記物與鏈霉親和素結合。

8.根據權利要求1-7中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述第一標記物、第二標記物分別獨立地為化學發光標記物，選自魯米諾及其衍生物、異魯米諾及其衍生物、吖啶酯及其衍生物、金剛烷、稀土元素和聯吡啶釕配合物。

9.根據權利要求1-7中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述第一標記物、第二標記物分別獨立地為化學發光催化劑，其選自辣根過氧化物酶和/或堿性磷酸酶。

10.根據權利要求1-7中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述固相載體選自磁性微球、塑料微球、塑膠微粒、微孔板、玻璃、毛細管和尼龍；優選磁性微球。

11.根據權利要求10所述的試劑套裝，其特征在于，所述磁性微球的粒徑0.05-50微米；優選0.1-40微米；更優選5-20微米。

12.根據權利要求1-11中任意一項所述的試劑套裝，其特征在于，所述組分a中固相載體以及與之結合的第一抗體或其結合片段的濃度為1-100mg/mL，優選10-50mg/mL；和/或，所述組分b中第一標記物以及與之結合的第二抗體或其結合片段的濃度為1-100mg/mL，優選10-50mg/mL；和/或，所述組分d中第二標記物以及與之結合的第三抗體或其結合片段的濃度為1-100mg/mL，優選10-50mg/mL。