[發明專利]棒狀桿菌基因JNy31014在提高L-賴氨酸產量中的應用有效
| 申請號: | 201810806965.8 | 申請日: | 2018-07-21 |
| 公開(公告)號: | CN109762779B | 公開(公告)日: | 2021-05-28 |
| 發明(設計)人: | 汪俊卿;薛樂;王瑞明;范翰;李丕武;修翔;張麗華;王松江;王建彬;郭傳莊;隋松森 | 申請(專利權)人: | 齊魯工業大學;諸城東曉生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/77 | 分類號: | C12N15/77;C12N1/21;C12P13/08;C12R1/15 |
| 代理公司: | 濟南竹森知識產權代理事務所(普通合伙) 37270 | 代理人: | 朱家富 |
| 地址: | 250353 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 桿菌 基因 jny31014 提高 賴氨酸 產量 中的 應用 | ||
1.一種利用谷氨酸棒狀桿菌生產L-賴氨酸的方法,其特征在于,通過利用谷氨酸棒狀桿菌發酵制備L-賴氨酸,所述谷氨酸棒狀桿菌的構建步驟如下:
(1)提取谷氨酸棒狀桿菌(
所述PCR擴增的引物核苷酸序列如下:
F1:CGCGAATTCCACTTATCAGCCTCAACACTCC
R1:AGGCCAGCAAAAGTTTCTTATGCAACGCCCACC;
(2)制備抗性標簽Cmr片段,然后將步驟(1)制得的同源臂序列與抗性標簽Cmr片段鏈接,制得融合基因片段;
(3)制備谷氨酸棒狀桿菌(
(4)將步驟(2)制得的融合基因片段轉化步驟(3)制得的感受態細胞,經復蘇、篩選目的基因成功整合到谷氨酸棒狀桿菌基因組的陽性克隆,即得;
所述谷氨酸棒狀桿菌為谷氨酸棒狀桿菌(
2.如權利要求1所述的方法,其特征在于,所述步驟(2)中,Cmr片段來源于穿梭質粒pHT01。
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