[發明專利]一種適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌培養方法

在審

• 申請號: 201810798637.8
• 申請日: 2018-07-19
• 公開（公告）號: CN108676764A
• 公開（公告）日: 2018-10-19
• 發明（設計）人: 張新中;姚婷;劉凱;楊愛麗;宋大德;姜玉星;嚴棟梁
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達;魏峯

本發明涉及一種適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌培養方法，包括：在容器中加入二氧化氯殺菌、大蘇打除氯自來水，然后先后添加氯化鎂和氯化鈣、滅活大腸桿菌C600菌液和蛭弧菌菌種，消泡劑，使用加熱棒調節溫度至25～30℃，使用氣泵配合氣石曝氣、攪水；待培養液變清澈透亮后補充滅活C600濃縮菌液；維持溫度和曝氣，培養5?7天后，即得。本發明相比現有培養方法更加適合于對蝦養殖塘口的蛭弧菌的培養，不需要高端的儀器設備和很高的專業知識，而且沒有繁瑣的擴大培養步驟，生產出的蛭弧菌可以廣泛的應用于對蝦的養殖，提高對蝦幼苗的成活率，降低對蝦的發病率，改善養殖水體，無污染，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于蛭弧菌培養領域，特別涉及一種適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌培養方法。

背景技術

蛭弧菌是一種能夠靠捕食細菌為生的革蘭氏陰性菌，其具有廣鹽性的特點，在淡水、海水等中廣泛存在，因其可裂解大多數革蘭氏陰性菌和一部分少數革蘭氏陽性菌，有著防治水體中的致病菌的作用，被廣泛的應用到水產養殖中。

目前市面上主要有三角瓶培養、血清瓶培養、種子罐或者發酵罐培養等一系列培養方式。發酵罐培養是三角瓶培養的放大培養，在本質上是沒有什么區別的，在培養的過程中需加入滅活C600濃縮菌液來為蛭弧菌的營養來源，然后再經過血清瓶、種子罐到發酵罐等放大培養，來成批量的培養蛭弧菌，在期間需要注意檢測培養液的OD值和pH的變化不斷，適時的補料，最后即可得到高濃度的蛭弧菌液。

現有使用發酵罐的培養方式并不適合對蝦養殖塘口的需求，目前蛭弧菌價格普遍偏高，蛭弧菌的培養都需要較高的設備和儀器，并不能滿足對蝦養殖戶對于降低成本這一要求，甚至有些養殖戶高價購得的蛭弧菌沒有任何的裂解有害菌的能力，存在假貨或者摻假的問題菌液，以上這些都是現在市面上存在的現象。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌培養方法，該方法解決了目前市場上蛭弧菌培養成本過高，裂解能力不合格的問題。

本發明的一種適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌培養方法，包括：

在容器中加入除氯自來水，然后先后添加終濃度為20-30mg/L的氯化鎂和氯化鈣、1％-2％的滅活大腸桿菌C600菌液和0.5％-1％的蛭弧菌菌種，消泡，使用加熱棒調節溫度至25～30℃，使用氣泵配合氣石曝氣、攪水；待培養液變清澈透亮后補充滅活C600濃縮菌液；維持溫度和曝氣，培養5-7天后，即得到適合對蝦養殖塘口的蛭弧菌菌液。

所述宿主為大腸桿菌C600。

所述消泡采用植物油消泡。

所述培養時間為5-7天。

有益效果

(1)本發明在培養蛭弧菌的成本和效率方面都做出了一定程度上的調節和改善，降低了養殖戶使用蛭弧菌時所需的成本，而且操作簡單方便，并不需要很高的儀器設備和專業知識即可生產出蛭弧菌菌液；而且沒有繁瑣的擴大培養步驟，生產出的蛭弧菌可以廣泛的應用于對蝦的養殖；

(2)本發明解決了在對蝦養殖塘口培養蛭弧菌的一些客觀的問題，如加熱棒的添加適用于很多不同地區和氣候；氣泵配合氣石的使用一方面可以為水體補充氧氣，還有著攪拌水體的作用，防止菌沉聚，這樣一物兩用節約了成本；

(3)本發明相比現有培養方法更加適合于對蝦養殖塘口的蛭弧菌的培養，提高對蝦幼苗的成活率，降低對蝦的發病率，改善養殖水體，無污染，具有良好的應用前景。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。