[發明專利]抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物及其制備方法

在審

• 申請號: 201810796564.9
• 申請日: 2018-07-19
• 公開（公告）號: CN109053746A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 周文兵;李江舟;計思貴;張立猛;崔永和;李春林;納紅艷;黃智華
• 申請（專利權）人: 云南省煙草公司玉溪市公司
• 主分類號: C07D491/048
• 分類號: C07D491/048;A01N43/90;A01P1/00
• 代理公司: 北京名華博信知識產權代理有限公司 11453
• 代理人: 李中強

1.抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物，其特征在于：其結構式為：

2.根據權利要求1所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：具體包括以下步驟：

1)粗粉制備：將全株煙株自然陰干，粉碎后過40目篩得到樣品粗粉；

2)浸膏提取：稱取樣品粗粉，用95％甲醇浸泡24小時后裝入滲漏桶，壓實后用95％甲醇滲漏提取至提取液顏色較淺為止，合并濾液后減壓濃縮得浸膏，于4℃冰箱中保存備用；

3)硅膠柱層析分離：將浸膏用蒸餾水懸濁，分別經石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，將乙酸乙酯萃取部分與60-100目硅膠拌樣晾干后上100-200目硅膠色譜柱進行柱層析分離，用體積比為1:0～8:2的氯仿-甲醇進行梯度洗脫，得到組分Fr.1～Fr.4；將Fr.2用小孔樹脂(MCI)除去色素后，經200～300目硅膠柱層析，以體積比為10:1～2:1的石油醚-丙酮進行梯度洗脫，得到3個部分Fr.2-1～Fr.2-3；

4)反相柱層析：將Fr.2-2經反相RP-18色譜柱，以體積濃度分別為30％、70％和100％甲醇水溶液進行梯度洗脫，收集各部分洗脫液并濃縮；

5)高壓色譜分離純化：再經制備和半制備分離純化得到生物堿類化合物。

3.根據權利要求2所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：步驟2)中，粗粉與甲醇體積比為1:5。

4.根據權利要求3所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：步驟2)中，乙酸乙酯萃取部分與硅膠按1:1.2比例拌樣。

5.根據權利要求4所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：步驟3)中，氯仿-甲醇的體積比為1:0、9:1、7:1、8:2。

6.根據權利要求5所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：步驟3)中，石油醚-丙酮的體積比為10:1、7:1、5:1、3:1、2:1。

7.根據權利要求6所述的抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物的制備方法，其特征在于：步驟5)中，制備條件為¹⁸C-反相色譜柱、流速10ml/min，乙腈：水35:65；半制備條件為¹⁸C-反相色譜柱、流速2ml/min，乙腈：水30:65。

8.抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物在抗煙草普通花葉病毒藥物中的應用，其特征在于：所述抗煙草普通花葉病毒病活性生物堿類化合物是利用權利要求7的方法制備得到的。