[發(fā)明專利]一種植物乳桿菌細菌素的抗體、試劑盒及其使用方法

有效

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• 申請日: 2018-07-19
• 公開（公告）號: CN109030821B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設計）人: 謝遠紅;張紅星;劉慧;金君華
• 申請（專利權）人: 北京農(nóng)學院
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 趙麗娜

本發(fā)明涉及一種植物乳桿菌細菌素的抗體、試劑盒及其使用方法。本發(fā)明所述植物乳桿菌細菌素的抗體，經(jīng)氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示蛋白免疫獲得，能夠準確、高效地檢測植物乳桿菌細菌素，具有特異性好、靈敏度高的優(yōu)點。

技術領域

本發(fā)明涉及生物檢測領域，具體而言，涉及一種植物乳桿菌細菌素的 抗體、試劑盒及其使用方法。

背景技術

細菌素作為一種安全高效的天然生物抑菌劑，近年來在食品保藏和抑 菌類藥物開發(fā)等行業(yè)的應用受到了極大的關注。細菌素(bacteriocins)是某 些細菌產(chǎn)生的具有抑菌生物活性的多肽、蛋白質或蛋白質復合物。細菌素 最初是從革蘭氏陰性細菌大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的。由乳酸菌代謝所產(chǎn)的細菌素 被稱為乳酸菌素，是一種安全的蛋白類物質，可被蛋白酶消化，對真核細 胞無影響。同時可抑制某些病原菌和腐敗菌的生長，如：抑制食品中單核 細胞增生李斯特氏菌、金黃色葡萄球菌、幽門螺桿菌和沙門氏菌等致病菌。

乳酸菌素能夠成為天然生物防腐劑的開發(fā)對象基于以下特點：①其產(chǎn) 生菌乳酸菌生長繁殖快，生產(chǎn)周期短，具有工業(yè)化生產(chǎn)前景；②具有人體 蛋白酶生物降解性，不會在人體內(nèi)蓄積，也不會對人體腸道的正常菌群產(chǎn) 生影響；③不同于抗生素會耐藥性，不會誘發(fā)致病微生物對抗生素的抗性； ④便于現(xiàn)代基因工程技術對細菌素基因進行修飾和克隆。乳酸菌的分離源 多數(shù)為具有益生特性的傳統(tǒng)發(fā)酵食品和人體腸道，因此，具有抗菌活性的乳酸菌及其代謝產(chǎn)物被認為是基本安全的。

乳酸乳球菌素Nisin和乳酸片球菌素Pediocin是目前大規(guī)模商業(yè)化應用 的乳酸菌細菌素，已經(jīng)被80多個國家允許作為食品防腐劑，主要應用在加 工奶酪、牛奶制品和罐頭制品中。

申請人從天然發(fā)酵的肉制品中篩選得到一株植物乳桿菌。通過體外抑 菌實驗證實，植物乳桿菌能夠代謝產(chǎn)生一種細菌素蛋白，命名為植物乳桿 菌細菌素，該細菌素蛋白對單核細胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、屎腸球菌(Enterococcusfacealis)、大腸桿菌(Escherichia coli)、沙門氏菌(Salmonella enteritidis)、志賀氏菌(Shigella dysenteriae) 等都具有一定的抑菌效果。由于植物乳桿菌細菌素對大腸桿菌、沙門氏菌、 志賀氏菌等革蘭氏陰性菌都具有一定的抑菌效果，相對于Nisin在食品防腐保鮮領域具有更為廣闊的應用前景。

而目前限制植物乳桿菌細菌素在食品保鮮應用中存在的最大問題是， 還沒有建立食品中植物乳桿菌細菌素的定量檢測方法。由于植物乳桿菌細 菌素是一種蛋白質，因此建立針對植物乳桿菌細菌素的免疫學定量檢測方 法顯得尤為重要。

有鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供一種植物乳桿菌細菌素的抗體，所述抗體 能夠準確、高效地檢測該植物乳桿菌細菌素。

本發(fā)明的第二目的在于提供一種試劑盒，所述試劑盒包括前述抗體， 能夠準確、高效地檢測植物乳桿菌，進一步地，所述試劑盒以抗體M301 作為包被抗體，抗體M123作為檢測抗體，二者配對成功，在檢測植物乳桿 菌時具有準確性好、靈敏度高的優(yōu)點。

本發(fā)明的第三目的在于提供一種植物乳桿菌細菌素的檢測方法，所述 方法使用前述抗體或試劑盒。

為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種植物乳桿菌細菌素的抗體，所述抗體經(jīng)氨基酸序列如SEQ ID NO： 1所示蛋白免疫獲得。

在一些具體的實施方式中，所述抗體為M301或M123，其中，所述抗 體M301由保藏編號為CGMCC No.15194的雜交瘤產(chǎn)生，所述抗體M123 由保藏編號為CGMCC No.15193的雜交瘤產(chǎn)生。

本發(fā)明還涉及一種試劑盒，所述試劑盒包括前述抗體。