[發明專利]四季秋海棠的組織培養方法

在審

• 申請號: 201810777811.0
• 申請日: 2018-07-16
• 公開（公告）號: CN108633741A
• 公開（公告）日: 2018-10-12
• 發明（設計）人: 張開明;田耕;王陽;李小紅;屈瑩;白雪;司靜雅
• 申請（專利權）人: 河南農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 河南大象律師事務所 41129
• 代理人: 范志遠

1.一種四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)滅菌：選取四季秋海棠的完全展開葉為外植體，先用自來水沖洗，后用酒精浸泡，再用無菌水清洗，而后用次氯酸鈉消毒，再用無菌水二次沖洗，將四季秋海棠的外植體切割接種；

(2)營養液浸泡：配置1/2MS+9.0mg/L 6-BA營養液,在25℃下將外植體放入其中浸泡1h；

(3)葉片組織培養：將經過步驟(2)營養液浸泡的外植體放入含不同激素及配比的MS基本培養基中，依次進行：誘導外植體形成愈傷組織，誘導愈傷組織生成幼芽，誘導幼芽增殖，誘導幼芽進行生根得到成苗；

(4)煉苗與移栽：將步驟(3)的成苗放入培養瓶中，打開培養瓶蓋子室內煉苗2天，取出成苗洗凈基部培養基，栽入珍珠巖：腐殖質＝1：2的基質中。

2.根據權利要求1所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(1)中選擇中等成熟的四季秋海棠葉片作為外植體。

3.根據權利要求2所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(2)中基本培養基為MS培養基+0.2mg/L TDZ+0.05mg/L NAA，浸泡1h。

4.根據權利要求3所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(3)中誘導外植體分化的培養基及培養條件為：MS+0.2mg/L TDZ；培養時間30天；培養條件為：溫度23-27℃，光照14h/d，光照強度2000Lux。

5.根據權利要求4所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(3)中誘導幼芽增殖的培養基及培養條件為：MS+0.5mg/L 6-BA+0.12mg/L NAA；培養時間為30天；培養條件為：溫度23-27℃，光照14h/d，光照強度2000Lux。

6.根據權利要求5所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(3)中誘導芽進行生根的培養基及培養條件為：1/2MS+0.1mg/L NAA；培養時間為15天；培養條件均為溫度23-27℃，光照14h/d，光照強度2000Lux。

7.根據權利要求6所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(4)中移栽后的培養條件為光照強度穩定在1200-2000Lux，溫度為18-20℃，濕度為69.5％的溫室內環境。

8.根據權利要求7所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(1)中滅菌時，先用自來水涮洗30秒，再用體積分數75％的酒精浸泡5秒，然后用無菌水充分清洗5次，再用質量分數0.25％的次氯酸鈉消毒15分鐘，最后用無菌水充分沖洗5次。

9.根據權利要求8所述的四季秋海棠的組織培養方法，其特征在于：所述步驟(1)中將外植體切割分為約0.8cm×0.8cm大小的組織。