[發明專利]一種用于植物多糖的分離純化方法

有效

• 申請號: 201810771707.0
• 申請日: 2018-07-13
• 公開（公告）號: CN109021131B
• 公開（公告）日: 2021-04-16
• 發明（設計）人: 胡洪超;舒緒剛;許丹寧;蔣旭紅;龔勝;程杏安;倫靜雯
• 申請（專利權）人: 仲愷農業工程學院
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 陳娟

本發明涉及一種多糖提純方法技術領域，尤指一種用于植物多糖的分離純化方法，主要包括以下步驟：1）將植物粉碎得到植物粉末；2）添加植物粉末、果膠酶、纖維素水解酶進行反應；3）添加乙酸?乙酸鈉緩沖溶液調節pH值，在緩沖溶液中進行酶解；4）添加去離子水提取；5）先后用快速、慢速定性濾紙進行抽濾獲得提取液；6）添加硫酸鋅攪拌溶解；7）添加氫氧化鈉溶液攪拌靜置；8）再次抽濾收集濾液；9）減壓濃縮濾液，干燥后得到純化多糖；本發明目的在于采用活性膠體對天然產物的吸附分離技術，利用膠體粒子的高分散性、高吸附性、以及可通過調節膠體粒子的帶電性，對不同雜質進行吸附，包括蛋白質和各類黃酮、酚類等帶色物質，從而最大程度地分離純化植物多糖并保障植物多糖結構不被破壞。

技術領域

本發明涉及一種多糖提純方法技術領域，尤指一種用于植物多糖的分離純化方法。

背景技術

人類預防和治療疾病的來源物質，重要來源之一是天然產物，世界各地的各種傳統醫藥學中所使用的藥物或保健品均屬于天然來源的物質，在現代醫藥學應用中，縱然是化學藥物，其中的天然來源的化合物也超過了30％占比，天然產物活性物質結構新穎、療效高，使用后產生副作用少，因此越來越多的藥物是以天然產物活性物質為先導化合物經過結構修飾而研發，目前天然產物的獲取方法包括提取和純化。

關于天然產物的獲取方法，其中的提取技術主要分為超聲波輔助方法、索氏提取方法、醇提方法、微波輔助提取的方法、稀酸或者稀堿液浸提方法、酶解方法、熱水提取方法等幾類方法，這些提取技術屬于目前較為成熟的工藝技術，操作方法比較簡單；而分離純化方法是天然產物開發利用的難點和重點，目前分離純化有兩個方向需要平衡：1)提取物的純凈度、2)提取工藝的經濟性，當提取工藝嚴謹縝密程度較高時，一般可以使得產品純度提高，但隨著工藝步驟的繁瑣延長，產品的提取率降低，能耗增加，消耗更多的水和其他溶劑，并加重環境負荷，且根據不同類型的提純產物，純化工藝不同，需要研制多種純化工藝以提純不同產物。

糖蛋白由多糖和蛋白質構成，能夠識別和接受細胞所需的特定物質，進而向細胞內部傳遞信息，實現生物催化和物質轉換的生理過程；多糖由許多個單糖分子聚合而成，且廣泛存在于動植物體內和微生物的細胞壁中，它是構成生命的四大基本物質之一；現已發現多糖化合物具有數百種，隨著生物技術和化學提純技術的發展，越來越多的多糖化學結構和藥理作用被人們逐步發現并加以應用；然而，不同物種的多糖由于其結構、分子量、溶解度的不同導致的其藥理作用各不相同，并且體現出了豐富多彩的生物活性，不同的多糖的生理作用包括：抗腫瘤作用、降低血糖作用、抗衰老作用、抗輻射作用和增強免疫力作用等。

多糖提取后的純化方法有多種，以水熱法提取物為例，包括活性炭吸附法、醇沉法、膜過濾法、氧化脫色法、石灰乳沉淀脫色法、離子交換樹脂脫色法、絮凝劑脫色法、柱層析法和電泳法等；實際的多糖純化技術往往是多個方法組合使用，如采用氧化脫色法后采用膜分離，然后采用柱層析法繼續純化；這幾種純化技術總結下可分為幾類：化學氧化法(通過氧化破壞各種脫色物質而純化多糖)、吸附法(通過物理和化學吸附來純化多糖，如活性炭吸附法、石灰乳沉淀脫色法、離子交換樹脂脫色法和絮凝劑脫色法)、層析洗脫法(柱層析法)、電泳法(通過電場對不帶電多糖進行分離)、溶劑法(醇沉法，通過乙醇等調節溶液極性，進而分理出多糖)和過濾法(膜過濾法)。

化學氧化法的好處是方便快速，但會氧化破壞多糖，影響其活性；吸附法純化效率低，多糖與其他雜質被一起吸附；電泳法熱效應對對產物活性有較大影響，能耗大；溶劑法消耗大量溶劑，溶劑回收需要消耗大量能源，廢溶劑對環境破壞大；膜過濾法的膜材的價格高，膜過濾能耗大，成本高；以白術多糖水熱法提取，層析法純化為例，得到的白術多糖粗提取試樣再采用Sevag法純化，當白術多糖的提取純化工藝中經過H₂O₂氧化脫色，嚴重影響白術多糖的活性；采用Sevag法脫蛋白，或采用透析初步純化、采用DEAE纖維素柱層析，均為工藝復雜的方法，僅適合實驗室純化，如用于工業生產，成本過高，工業生產中無法長期承擔。

發明內容