[發(fā)明專利]檢測UCP1基因的試劑盒及膳食攝入量計算方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810770781.0
• 申請日: 2018-07-13
• 公開（公告）號: CN108841970A
• 公開（公告）日: 2018-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳少鴻;詹延延;朱美蘭;劉浩;周文根;姜萍萍
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳美因醫(yī)學檢驗實驗室
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888
• 代理公司: 深圳市中科創(chuàng)為專利代理有限公司 44384
• 代理人: 譚雪婷;高早紅

1.一種檢測UCP1基因的試劑盒，用于檢測rs1800592位點基因類型，其特征在于，包括：ddH₂O、Buffer、MgCl₂、dNTP Mix、DNA Polymerase、PCR引物組、探針；所述PCR引物組包括一上游引物和一下游引物；

所述上游引物的序列為GGAAGACATTTTGTGCAGCGAT，所述下游引物序列為TCAGTATGAGCAAGGGCAACT；所述探針為5′-FAM-TTAACAAATGCACTCGATCAAACT-3′-BHQ1。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測UCP1基因的試劑盒，其特征在于，所述Buffer為Buffer，所述DNA Polymerase為DNA Polymerase。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測UCP1基因的試劑盒，其特征在于，所述Buffer終濃度為1×，所述MgCl₂的終濃度為0.5mM，所述dNTP Mix的終濃度為0.2mM，所述DNAPolymerase的終濃度為0.05U，所述上游引物的終濃度為0.25μM，所述下游引物的終濃度為0.05μM，所述探針的終濃度為0.1μM。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測UCP1基因的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應(yīng)程序設(shè)置參數(shù)如下：

5.一種膳食攝入量計算方法，包括以下步驟，

S1：基礎(chǔ)代謝能量消耗計算，采用Mifflin-St Jeor(MSJE)公式來測算個人的基礎(chǔ)代謝；修正系數(shù)為0.95；

男:BMR_MSJE＝10*W+6.25*H-5*Y+5；

女:BMR_MSJE＝10*W+6.25*H-5*Y-161；

BMR＝0.95*BMR_MSJE；

其中W為個體體重，單位kg；H為個體身高，單位cm；Y為個體年齡；BMR_MSJE單位為kcal；

S2：采用權(quán)利要求1-4任一項所述的檢測UCP1基因的試劑盒檢測rs1800592位點基因類型，按如下公式進行修正，

BMR_gene＝BMR+E；

rs1800592位點基因型分為AA、AG、GG，對應(yīng)的修正值E分別為0、-60kcal、-100kcal。

S3：日推薦攝入量的計算，根據(jù)個體的身體活動水平計算每日推薦膳食攝入量；日推薦攝入量＝BMR_gene*身體活動水平系數(shù)；

身體活動水平分為：極輕度、輕度、中度、高度、極高度，對應(yīng)的身體活動水平系數(shù)分別為：1.3、1.4、1.5、1.7、1.9。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的膳食攝入量計算方法，其特征在于，在步驟S2中，該試劑盒的檢測方法包括以下步驟：

S21：待測樣本的擴增，采用單熒光標記探針，設(shè)計待測樣本的引物及探針序列，進行PCR擴增；

S22：樣本檢測，通過熔解曲線峰型圖檢測已擴增的位點，得到對應(yīng)位點的基因型結(jié)果，rs1800592位點存在AA、AG、GG三種基因型；

S23：根據(jù)基因型結(jié)果，修正受檢者的基礎(chǔ)代謝并用于后續(xù)的個體日推薦攝入量的計算。