[發明專利]一種抗腸炎沙門氏菌的納米抗體及其應用

有效

• 申請號: 201810769826.2
• 申請日: 2018-07-13
• 公開（公告）號: CN108864281B
• 公開（公告）日: 2020-09-08
• 發明（設計）人: 王妍入;何一欣;王建龍;張道宏
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C12N15/13;C12P21/02;G01N33/569
• 代理公司: 西安恒泰知識產權代理事務所 61216
• 代理人: 孫雅靜

本發明涉及一種抗腸炎沙門氏菌的納米抗體及其應用。該抗體具有與腸炎沙門氏菌結合的功能。本發明公布了這種納米抗體及編碼該納米抗體的基因序列，該納米抗體的表達載體和宿主細胞以及生產該納米抗體的方法。本發明的抗腸炎沙門氏菌的納米抗體具有體積小、表達效率高、溶解性好、穩定性強等優點。本發明還包括抗腸炎沙門氏菌的納米抗體的應用。

技術領域

本發明涉及分子生物學、噬菌體展示技術以及蛋白質組學領域，具體涉及一種抗腸炎沙門氏菌的納米抗體及其應用。

背景技術

沙門氏菌為革蘭氏陰性短桿菌，目前發現的有約一千多種，可引起家畜、鼠類和禽類等動物疾病，一旦污染了人類的食物便會造成人類食物中毒。沙門氏菌主要包括副傷寒甲桿菌、副傷寒乙桿菌、鼠傷寒桿菌、副傷寒丙桿菌、豬霍亂桿菌、傷寒桿菌和腸炎桿菌等。其中，腸炎沙門氏菌具有很強的侵害性，主要污染肉、蛋、禽和水產品，能夠引起人類腸炎和食物中毒。據統計，在日本、美國等發達國家，發生的食物中毒事件中由腸炎沙門氏菌引起的占近80％，給人類健康和社會經濟造成了嚴重的影響。

腸炎沙門氏菌的傳統檢測方法為培養法，將樣品進行增菌后，再進行分離培養，對檢出的可疑菌落進行生化試驗和血清學鑒定。培養法是目前世界各國檢測沙門氏菌的金標準，普遍用于食品中腸炎沙門氏菌的檢測，也是沙門氏菌檢驗的仲裁方法。然而，該方法具有檢測時間長的缺點，往往需要4～7天才能得到檢測結果，無法滿足快速篩查的要求，因此，建立快速、準確的腸炎沙門氏菌的檢測方法，對保障食品安全和消費者的健康具有重要意義。

免疫分析方法是基于抗原抗體反應的分析方法，具有檢測靈敏度高、操作簡便、成本低等優點。免疫分析方法的核心是抗體，目前市場上已經有抗腸炎沙門氏菌的單克隆和多克隆抗體，然而，多克隆抗體具有均一性差的缺點，單克隆抗體的生產過程復雜，周期長，成本較高，迫切需要一種特異性好、生產成本低、性能穩定的抗體。駱駝科動物體內天然存在一類缺失輕鏈的抗體，稱為重鏈抗體，將重鏈抗體克隆表達可獲得單域重鏈抗體，因其體積小(僅17KD左右)，又被稱為納米抗體。納米抗體是一種基因工程抗體，具有生產成本低、表達效率高、便于基因改造、穩定性好等優勢，具有非常好的應用前景。然而，目前，抗腸炎沙門氏菌的納米抗體還未見報道。因此，迫切需要開發有效的抗腸炎沙門氏菌的納米抗體。

發明內容

本發明目的是提供一種有效的抗腸炎沙門氏菌的納米抗體及其應用。

一種抗腸炎沙門氏菌的納米抗體，所述的納米抗體的氨基酸序列框架區包括FR1、FR2和FR3，互補可變區包括CDR1、CDR2和CDR3；

所述的FR1選自以下一種的序列：SEQ ID NO:3所示序列；與SEQ ID NO：3具有90％以上同源性的序列；所述的FR2選自以下一種的序列：SEQ ID NO:4所示序列；與SEQ ID NO：4具有90％以上同源性的序列；所述的FR3選自以下一種的序列：SEQ ID NO:5所示序列；與SEQ ID NO：5具有90％以上同源性的序列；

所述的CDR1選自以下一種的序列：SEQ ID NO:6所示序列；與SEQ ID NO：6具有90％以上同源性的序列；所述的CDR2選自以下一種的序列：SEQ ID NO:7所示序列；與SEQID NO：7具有90％以上同源性的序列；所述的CDR3選自以下一種的序列：SEQ ID NO:8所示序列；與SEQ ID NO：8具有90％以上同源性的序列。

可選的，所述的納米抗體的氨基酸序列選自以下一種的序列：SEQ ID NO:1所示序列；與SEQ ID NO：1具有90％以上同源性的序列。

可選的，所述的納米抗體的DNA序列選自以下一種的序列：SEQ ID NO:2所示序列；與SEQ ID NO：2具有90％以上同源性的序列。

本發明所述的抗腸炎沙門氏菌的納米抗體用于食品中腸炎沙門氏菌檢測的應用。

可選的，所述的食品包括飲用水、牛奶、飲料和果汁。