[發(fā)明專利]一種激光輔助細胞分選裝置及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810765587.3
• 申請日: 2018-07-12
• 公開（公告）號: CN109097244A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發(fā)明（設計）人: 鄧宇;王文兵;郭鐘寧
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東工業(yè)大學
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12M1/42;C12N5/00;C12N13/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

1.一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，包括工作站（1）、與所述工作站（1）電連接的激光器（2）、三維移動平臺（3）、激發(fā)光源（4）和PMT組件（5），所述三維移動平臺（3）上設有接收件（6），所述接收件（6）的上方由下往上依次設有微陣列芯片（7）、物鏡（8）、半反半透鏡（9）、同軸模塊（10）和濾光模塊（11），所述激光器（2）的位置滿足激光器（2）發(fā)出的激光經(jīng)所述半反半透鏡（9）反射后，再經(jīng)所述物鏡（8）聚焦在所述芯片微陣列芯片（7）上；所述激發(fā)光源（4）的位置滿足激發(fā)光源（4）發(fā)出的光經(jīng)過所述同軸模塊（10）后，透過所述半反半透鏡（9），再經(jīng)所述物鏡（8）聚焦在所述芯片微陣列芯片（7）上；所述PMT組件（5）設在所述濾光模塊（11）的上方。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述微陣列芯片（7）設在電移動平臺上，電移動平臺能夠驅(qū)動所述微陣列芯片（7）移動，所述電移動平臺與所述工作站（1）電連接。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述微陣列芯片（7）上設有陣列的微孔結(jié)構(gòu)，所述微陣列芯片（7）的上表面覆蓋有玻璃基片（12）。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述微孔結(jié)構(gòu)為二層階梯孔。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述微孔結(jié)構(gòu)的孔徑為細胞直徑的1.5-1.8倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述微陣列芯片（7）由PDMS或PMMA材料制作而成。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種激光輔助細胞分選裝置，其特征在于，所述激發(fā)光源（4）為多波段的激發(fā)光源。

8.一種激光輔助細胞分選方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1. 將帶有熒光標記的抗體與細胞懸浮液混合均勻，然后將細胞懸浮液涂覆在微陣列芯片（7）上，利用微孔結(jié)構(gòu)捕獲細胞，然后將微陣列芯片放置在玻璃基片（12）的下方，利用夾具將兩者固定好位置；

S2. 利用電移動平臺驅(qū)動微陣列芯片（7）移動，激發(fā)光源（4）發(fā)出的光經(jīng)過同軸模塊（10）再經(jīng)過物鏡（8）聚焦在微陣列芯片（7）上，對微孔結(jié)構(gòu)捕獲的細胞進行辨識；

S3. 步驟S2進行的同時，物鏡（8）收集微陣列芯片（7）上的熒光信號，經(jīng)過同軸模塊（10）和濾光模塊（11）濾去雜散光，PMT組件（5）檢測該熒光信號，并標記和定位細胞，并將標記和定位結(jié)果反饋給工作站（1）；

S4. 工作站（1）根據(jù)反饋的信息控制激光器（2）發(fā)射高能脈沖激光，同時控制電移動平臺驅(qū)動微陣列芯片（7）移動，使得高能脈沖激光經(jīng)過半反半透鏡（9）反射后再經(jīng)物鏡（8）聚焦在微陣列芯片（7）上的某一細胞上，激光空化效應形成脈沖壓力驅(qū)動該細胞分離，并移動至接收件（6）；

S5. 重復步驟S4，使得同一類型的細胞全部被分離，并移動到接收件（6）上；

S6. 工作站（1）控制三維移動平臺（3）移動，然后重復步驟S4和S5，使得不同類型的細胞均被分離，并移動至接收件（6）上的不同位置，實現(xiàn)低溫無損的細胞分選。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種激光輔助細胞分選方法，其特征在于，所述步驟S1中，不同抗體采用不同熒光染料標記。