[發明專利]鈉通道阻斷劑μ-TRTX-Ca1a作為鎮痛藥物的應用

有效

• 申請號: 201810762806.2
• 申請日: 2018-07-12
• 公開（公告）號: CN110713530B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發明（設計）人: 容明強;劉中華;張云霄
• 申請（專利權）人: 湖南師范大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;A61K38/17;A61P29/00
• 代理公司: 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210
• 代理人: 吳越

本發明涉及白線霜足蛛毒素μ?TRTX?Ca1a的氨基酸序列和基因序列以及應用，屬于生物醫學領域。μ?TRTX?Ca1a含有38個氨基酸殘基，其中六個半胱氨酸形成三對二硫鍵，分子量為4289.31 Da。白線霜足蛛毒素μ?TRTX?Ca1a能優先抑制鈉離子通道亞型Na_v1.7。白線霜足蛛毒素μ?TRTX?Ca1a能夠明顯的減輕小鼠福爾馬林模型、醋酸扭體模型以及熱板模型導致的疼痛，μ?TRTX?Ca1a能做為一種治療疼痛的藥物。

技術領域

本發明涉及白線霜足蛛多肽毒素μ-TRTX-Ca1a的發現和應用，屬于生物醫學技術領域。

背景技術

電壓門控離子通道是參與細胞電信號傳導的跨膜蛋白，是神經、肌肉、腺體等許多組織細胞膜上的基本興奮單元，它們能產生和傳導電信號，其活動與細胞的興奮、收縮、分泌和突觸傳遞等特異性功能密切相關。在所有哺乳動物鈉通道亞型中，Nav1.7，Nav1.8和Nav1.9主要分布在外周神經系統，參與疼痛信號的傳導，而Nav1.7是目前緩解慢性疼痛最有前景的目標之一。Nav1.7通道功能獲得性突變會導致神經病理性疼痛，包括紅斑性肢痛癥、陣發性劇痛癥、以及小纖維神經痛；相反，Nav1.7的功能缺失性突變會導致非功能性通道蛋白的表達，進而導致先天性無痛癥。在藥理學上抑制Nav1.7活性的化合物有可能治療慢性疼痛，因此靶向Nav1.7通道的專一性抑制劑有望發展為新型的鎮痛藥物。

蜘蛛毒液是一種高度復雜的混合物，主要含有蛋白質、多肽以及一些小分子物質。目前已經證實了這些多肽成分多為神經毒素，可特異性識別離子通道蛋白、膜受體及轉運蛋白。因此蜘蛛毒液中的成分具有廣泛的應用前途，如開發成為鎮痛藥物、治療自身免疫疾病藥物等。

發明內容

本發明提供一種白線霜足蛛多肽毒素μ-TRTX-Ca1a的基因、氨基酸序列及其作為鎮痛藥物的應用。

本發明提供的白線霜足蛛多肽毒素μ-TRTX-Ca1a，是從白線霜足蛛粗毒中通過反向高效液相色譜分離純化得到的，其氨基酸序列為IFECSISCEIEKEGNGKKCKPKKCKGGWKCKFNICVKV，該多肽包括38個氨基酸殘基，分子量為4289.31Da，等電點為9.20，分子內含有三對二硫鍵，排列方式為C1-C3、C2-C5和C4-C6。

白線霜足蛛多肽毒素μ-TRTX-Ca1a的基因克隆包括：白線霜足蛛毒腺總RNA提取，mRNA純化，mRNA反轉錄及cDNA文庫構建，設計引物，利用PCR方法篩選白線霜足蛛鈉離子通道抑制劑多肽基因。基因測序結果表明編碼白線霜足蛛鈉離子通道阻斷劑的基因由261個核苷酸組成，自5’端至3’端基因序列包括了信號肽、前體肽和成熟肽。

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本發明的白線霜足蛛多肽毒素μ-TRTX-Ca1a，對電壓門控鈉通道Nav1.7有非常顯著的抑制作用，是一種鈉通道抑制劑。同時，小鼠的鎮痛模型表明該多肽具有良好的鎮痛效果。

附圖說明

圖1：多肽毒素μ-TRTX-Ca1a的分離純化。A：白線霜足蛛粗毒C18反相HPLC分離純化，其中星號所示為目的峰。B：目的多肽進一步采用反相HPLC分離。C：目的分子的質譜鑒定圖。