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[發(fā)明專利]玉米開(kāi)花期基因ZCN8的兩個(gè)特異性分子標(biāo)記及其應(yīng)用有效

專利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201810749344.0 申請(qǐng)日: 2018-07-10
公開(kāi)(公告)號(hào): CN108866227B 公開(kāi)(公告)日: 2020-06-02
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 田豐;郭麗;王雪涵 申請(qǐng)(專利權(quán))人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
主分類號(hào): C12Q1/6895 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245 代理人: 關(guān)暢;何葉喧
地址: 100193 *** 國(guó)省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 玉米 開(kāi)花期 基因 zcn8 兩個(gè) 特異性 分子 標(biāo)記 及其 應(yīng)用
【權(quán)利要求書】:

1.一種鑒定玉米開(kāi)花期的方法,包括如下步驟:

以待測(cè)玉米的基因組DNA為模板,采用引物對(duì)甲進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物采用限制性內(nèi)切酶Msp I進(jìn)行酶切;所述引物對(duì)甲由序列表的序列4所示的正向引物和序列表的序列5所示的反向引物組成;

如果待測(cè)玉米的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物只有一種且可以被限制性內(nèi)切酶Msp I酶切,待測(cè)玉米的基因型為AA型;如果待測(cè)玉米的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物只有一種且不能被限制性內(nèi)切酶Msp I酶切,待測(cè)玉米的基因型為CC型;

AA型植株的開(kāi)花期晚于CC型植株。

2.一種鑒定玉米開(kāi)花期的方法,包括如下步驟:

檢測(cè)待測(cè)玉米基因組DNA中特異DNA分子的第317-321位核苷酸,判斷待測(cè)玉米的基因型;

如果待測(cè)玉米基因組DNA中特異分子的該區(qū)段存在限制性內(nèi)切酶Msp I的識(shí)別序列、待測(cè)玉米的基因型為AA型,如果待測(cè)玉米基因組DNA中特異分子的該區(qū)段不存在限制性內(nèi)切酶Msp I的識(shí)別序列、待測(cè)玉米的基因型為CC型;

AA型植株的開(kāi)花期晚于CC型植株;

所述特異DNA分子為引物對(duì)甲的靶序列所示的DNA分子;所述引物對(duì)甲由序列表的序列4所示的正向引物和序列表的序列5所示的反向引物組成。

3.用于檢測(cè)特異區(qū)段核苷酸的物質(zhì)在鑒定玉米開(kāi)花期中的應(yīng)用;

所述特異區(qū)段核苷酸為玉米基因組DNA中特異DNA分子的第317-321位核苷酸;

所述特異DNA分子為引物對(duì)甲的靶序列所示的DNA分子;所述引物對(duì)甲由序列表的序列4所示的正向引物和序列表的序列5所示的反向引物組成。

4.引物對(duì)甲;所述引物對(duì)甲由序列表的序列4所示的正向引物和序列表的序列5所示的反向引物組成。

5.一種鑒定玉米開(kāi)花期的方法,包括如下步驟:

以待測(cè)玉米的基因組DNA為模板,采用引物對(duì)乙進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后將PCR擴(kuò)增產(chǎn)物采用限制性內(nèi)切酶Bsr I進(jìn)行酶切;所述引物對(duì)乙由序列表的序列8所示的正向引物和序列表的序列9所示的反向引物組成;

如果待測(cè)玉米的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物只有一種且可以被限制性內(nèi)切酶Bsr I酶切,待測(cè)玉米的基因型為AA型;如果待測(cè)玉米的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物只有一種且不能被限制性內(nèi)切酶Bsr I酶切,待測(cè)玉米的基因型為CC型;

AA型植株的開(kāi)花期晚于CC型植株。

6.一種鑒定玉米開(kāi)花期的方法,包括如下步驟:

檢測(cè)待測(cè)玉米基因組DNA中特異DNA分子的第32位核苷酸,該核苷酸作為特異核苷酸,判斷待測(cè)玉米的基因型;

如果待測(cè)玉米的所述特異核苷酸為G純合型、待測(cè)玉米的基因型為AA型,如果待測(cè)玉米的所述特異核苷酸為A純合型、待測(cè)玉米的基因型為CC型;

AA型植株的開(kāi)花期晚于CC型植株;

所述特異DNA分子為引物對(duì)乙的靶序列所示的DNA分子;所述引物對(duì)乙由序列表的序列8所示的正向引物和序列表的序列9所示的反向引物組成。

7.用于檢測(cè)特異SNP的物質(zhì)在鑒定玉米開(kāi)花期中的應(yīng)用;

所述特異SNP為玉米基因組DNA中特異DNA分子的第32位核苷酸;

所述特異DNA分子為引物對(duì)乙的靶序列所示的DNA分子;所述引物對(duì)乙由序列表的序列8所示的正向引物和序列表的序列9所示的反向引物組成。

8.引物對(duì)乙;由序列表的序列8所示的正向引物和序列表的序列9所示的反向引物組成。

9.一種引物組合物,由權(quán)利要求4所述引物對(duì)甲和權(quán)利要求8所述引物對(duì)乙組成。

10.權(quán)利要求9所述引物組合物、權(quán)利要求4所述引物對(duì)甲或權(quán)利要求8所述引物對(duì)乙在鑒定玉米開(kāi)花期性狀中的應(yīng)用。

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