[發明專利]一種海洋抗耐藥菌活性物質及制備和用途

有效

• 申請號: 201810745785.3
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN108913606B
• 公開（公告）日: 2020-03-03
• 發明（設計）人: 張治針;宋騰飛;連曉媛;陳夢宣
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;C12P17/18;C07D491/22;A61P31/04;C12R1/80
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 趙杭麗

本發明提供一種海洋灰黃青霉，分類命名為Penicillium griseofulvum ZZ380，是從海洋動物粗腿厚紋蟹中分離培養而獲得。本發明利用海洋灰黃青霉發酵制備獲得灰黃青霉堿雙醚A，所述灰黃青霉堿雙醚A具有抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的活性，可顯著抑制耐藥菌MRSA的生長，在治療耐藥菌MRSA感染方面具有應用前景，可在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中應用。灰黃青霉堿雙醚A化學結構式為：

技術領域

本發明屬醫藥領域,涉及從海洋灰黃青霉(Penicillium griseofulvumZZ380)的代謝產物中獲得的具有抗菌活性化合物灰黃青霉堿雙醚A(Penicipyrrodiether A)，以及其制備方法和在制備抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌藥物中的應用。

背景技術

抗生素濫用引起的致病菌對抗生素的耐藥性不斷增強,耐藥突變菌株的種類和數量不斷增多已成為威脅人類健康的一個重大難題。在金黃色葡萄球菌感染的病例中,被稱為超級細菌的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcusaureus,MRSA)感染所占比例已高達60％,其中30％的病例對萬古霉素產生了耐藥性并且呈逐年上升的趨勢。一直以來萬古霉素是治療MRSA感染的金標藥物,然而由于這一金標藥物在臨床上頻繁使用而導致MRSA對其耐藥性不斷增強。另一方面,微生物出現耐藥性變種的速率已經遠遠超過人類開發新型抗生素的速度,如何對抗耐藥菌株尤其是MRSA已成為世界性難題。

海洋特殊的物理化學環境以及生物多樣性和復雜性,迫使海洋微生物具有與陸地微生物不同的新陳代謝途徑、生存繁殖方式和適應機制，因而產生許多陸地微生物無法產生的化學結構新穎和生物活性獨特的代謝產物，是發現新型抗耐藥菌株活性物質的重要資源?；尹S青霉堿雙醚A(Penicipyrrodiether A)是從海洋灰黃青霉(PenicilliumgriseofulvumZZ380)的次生代謝產物中分離得到的一個結構新穎的生物堿類化合物,對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的生長具有好的抑制作用,因此灰黃青霉堿雙醚A在制備抗MRSA藥物方面具有應用前景。

發明內容

本發明的目的是提供一種海洋灰黃青霉，分類命名為Penicillium griseofulvumZZ380,已被中國典型培養物保藏中心保藏，保藏編號:CCTCC NO：2018344，保藏日：2018.6.4；保藏地址：中國.武漢.武漢大學。

本發明的第二個目的是提供所述海洋灰黃青霉的提取制備方法，是從海洋動物粗腿厚紋蟹(Pachygrapsus crassipes)中分離海洋真菌ZZ380的方法，通過以下步驟分離培養而獲得：

(1)灰黃青霉(Penicillium griseofulvumZZ380)的分離培養

取粗腿厚紋蟹(Pachygrapsus crassipes)在75％的乙醇中浸泡10秒除去表面微生物,然后用無菌水清洗三次后勻漿,離心后取上層液配制成不同濃度的懸浮液。取一定量不同濃度的懸浮液均勻分散到含有固體培養基的培養皿中,在室溫條件下培養一定時間后,將不同的菌落分別轉移到另一含有固體培養基的培養皿中,在室溫條件下繼續培養一定時間。最后將生長良好的單一菌落(ZZ380)接種到斜面培養基培養后置4℃冰箱保存備用。